Эффективность антидотной терапии при отравлении бромдиалоном в эксперименте

УДК 619:615.036.8
DOI 10.33861/2071-8020-2022-4-30-33

Дрозд М.Н., Усевич В.М. Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования
«Уральский государственный аграрный университет», г. Екатеринбург
Баркова А.С. Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования
«Калининградский государственный технический университет», г. Калининград
Бурцева Т.В. Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования
«Уральский государственный аграрный университет», г. Екатеринбург

До сегодняшнего дня не потеряли своей актуальности вопросы, связанные с отравлениями животных. Вопросами токсикологии занимается судебно-медицинская и судебноветеринарная экспертиза, этих вопросов не избежать и при проведении патологоанатомического вскрытия, для установления причины смерти человека и животных. В настоящее время наиболее частыми среди всех отравлений становятся отравления мелких домашних животных (кошек и собак), при этом разнообразие ядов достаточно обширное. Изучение вопроса отравлений антикоагулянтами и родентицидами представляет интерес для ветеринарной практики, так как яд действует не мгновенно. В гуманитарной медицинской практике отравления родентицидами встречается редко, только как случайный прием препаратов и представляет интерес преимущественно с точки зрения судебно-медицинской экспертизы, значительно реже в качестве адекватности терапии.

Группа препаратов, объединенная под общим названием родентициды, используется в качестве средств борьбы с грызунами, для проведения дератизации как на сельскохозяйственных предприятиях, так и в местах размещения объектов общественного питания и в частном секторе. В настоящее время имеется огромный арсенал родентицидных препаратов. Они были созданы в семидесятые годы ХХ века в целях преодоления резистентности к варфарину у крыс. Данные средства быстро всасываются, адсорбируются с поверхности кожных покровов, проникают в респираторный тракт, затем кумулируются в разных тканях, особенно в печени.

К родентицидам относят жирорастворимые антикоагулянты с длительной продолжительностью жизни, элиминируются в основном с калом и немного с мочой. Выведение их из печени идет в две фазы: от 2 до 8 дня проходит быстрая фаза элиминации, потом медленная. Варианты отравления родентицидами отображены у животных и у людей, причем около 60% у собак, а 20 % у кошек, редко у продуктивных животных.

В Российской Федерации используются лишь родентициды антикоагулянтного действия - суперварфарины, их всего 18 на базе 6 веществ: антикоагулянты 4-гидроксикумаринового ряда - бродифакум, бромадиолон, флокумафен и производные 1,3-индандиона - изопро-пилфенацин, трифенацин и этилфенацин. Родентициды с антикоагу-лятным действием - это антагонисты витамина К, антикоагулянтный эффект держится в течение многих лет и возможно накопление незначительных количеств этих средств в теле животных вплоть до смертельных доз. Период развития симптоматики коагулопатии проходит в интервале от 3 до 5 дней с времени начала попадания в организм грызуна. На фоне действия антикоагулянта происходит процесс угнетения аутосинтеза витамина К, в результате чего нарушается процесс свертывания крови и развиваются признаки геморрагического синдрома. Для дератизации чаще всего используют препараты, вызывающие нарушение свертывающей системы в организме животных. Так как препараты не имеют запаха, действуют отсрочено, то животные погибают постепенно и не связывают это с кормом, что дает возможность их использования для борьбы с грызунами.

В зависимости от химической формулы антикоагулянты имеют различное время для развития геморрагического синдрома и соответственно время наступления смерти, поэтому предпочтение отдается препаратам с более коротким сроком действия.

Токсиканты на основе суперварфаринов поступают через желудочно-кишечный тракт, всасываются в кровь и попадают в печень и почки, где аккумулируются. Родентициды легко смешиваются с обычными наполнителями, содержат красители, чтобы по цветным фекалиям грызунов оценить эффективность поедаемости. Для профилактики отравления людей препараты содержат горечи - битрекс.

Яды, используемые для дератизации, часто становятся причиной отравления собак и кошек. При возможности своевременной идентификации яда и оказания помощи значительно возрастает эффективность проводимой терапии.

При невозможности установления яда или использовании комбинированных ядов возможно оказание только симптоматической помощи, так как нет антидота или нет времени на его установление, в этом случае антитоксическая терапия заканчивается потерей животных. Все это уменьшает время на поиск эффективных схем лечения и спасения жизни животных [5, 6, 8, 13].

Симптомы отравления появляются не сразу, нарастание их до яркой клинической картины тоже протекает не одномоментно и поэтому правильное и своевременное распознавание клинической картины, а также знание анамнеза по контакту с ядами не всегда возможно. Все это осложняет диагностику отравлений [7, 9].

В настоящее время значительно возросло количество случаев отравления как бродячих, так и домашних животных различными ядами, что связано с деятельностью дог-хантеров. Если лечение начато с опозданием, то животное погибает в 99% случаев [10, 15]. Кошки чаще отравляются при свободном выгуле в дачный сезон, при поедании отравы для мышевидных грызунов или отравленных малоподвижных грызунов. Продолжительность лечения животных с отравлением родентицидами составляет от 3 до 4 недель [11, 12].

Лечение при явлениях геморрагического синдрома основано на введении витаминного антидота, чтобы восстановить свертывающую систему в организме животных. В качестве такого антидота используют синтетический препарат - витамин К. В настоящее время витамин К - это групповое название, которое объединяет несколько жирорастворимых витаминов: К1, К2, К3, К4, К5, К6, К7. Витамины К1 и К2 относят к природным, а остальные К3-К7 - к синтетическим.

Использование антидотов позволяет нейтрализовать действие токсикантов и относится к этиотропной терапии, так как направлено на устранение действия причины. Механизм действия витаминного антидота заключается в возмещении биологически активных веществ, разрушенных под влиянием антикоагулянта, функциональном антагонизме, противодействии токсическому эффекту попавшего в организм яда. Наиболее широко известны и применяются в медицине с лечебной целью витамины К1, К2 и К3, обладающие антигеморраги-ческим действием.

При подборе антидотной терапии при отравлениях родентицидами, не все из них одинаково действуют в лечении мелких домашних животных, так как ранее была доказана неэффективная терапия при использовании витаминов К2 и К3. На эффективность применения антидота влияет не только химическая формула антидота, но и скорость оказания помощи. Чем раньше начато лечение, тем меньше поражающее действие токсиканта на внутренние органы, тем быстрее и легче происходит восстановление, тем более вероятен благоприятный исход.

Использование витаминных антидотов имеет не стабильный терапевтический эффект, это заставляет вести поиск более эффективной схемы лечения, понять почему не сработали известные антидоты. По данным литературы, более эффективным средством антидотной терапии является витамин К1, другие формы витамина для лечения кошек и собак не эффективны и токсичны [11, 13, 15].

В связи с этим было проведено исследование на биологических моделях (белые крысы), с целью определения терапевтической эффективности витаминного антидота конакиона при отравлении бромдиалоном у животных в экспериментальных условиях.

Материалы и методы исследований. Исследования выполнены на кафедре инфекционной и незаразной патологии Уральского гос-агроуниверситета. По принципу аналогов подобраны 20 голов беспородных белых лабораторных крыс в возрасте 4-6 месяцев, живой массой 360 г. Животных разделили на опытную и контрольную группы по 10 крыс в каждой. Все животные получали одинаковый рацион (корм Little-one-rats, вода из автопоилок вволю). Кормление два раза в день. Животных содержали в клетках группами по 5 крыс в каждой. Ежедневно осуществляли клинический осмотр и контролировали потребление корма и воды.

С первого дня исследования после клинического осмотра животным скормили родентицид - «Крысиная смерть» (бромдиалон) с кормом. Бромдиалон - синтетический яд второго поколения, имеет большое значение в сельском хозяйстве, пользуется популярностью для борьбы против грызунов-вредителей. В организме замедляет синтез протромбина в печени и снижает свертываемость крови, развивается геморрагический диатез и васкулит, что приводит к гибели животного [2]. Препарат обладает резорбтивным и кумулятивным действием, отравляющий эффект проявляется не ранее 24-36 часов. Бромадио-лон остро токсичен при низких дозах. Для серой крысы острая ЛД50 составляет 0,65 мг/кг, хроническая пятикратная ЛД50 - от 0,06 до 0,14 мг/кг. [1]. Эффективность бромадиолона зависит от воздействия, то есть, потребления приманки целевым организмом. Противоядием в инструкции к препарату указан витамин К1 [4, 6, 9].

С момента появления клинических признаков на 5 день исследования в схему лечения животных опытной группы один раз в сутки вводили витамин К1 (конакион) из расчета 0,1 мл на голову индивидуально из инсулинового шприца без иглы внутрь. Конакион - это витамин К1 искусственного происхождения (фитоменадион), обладает гемостатическими свойствами (повышает свертываемость крови).

Крысы контрольной группы витаминный антидот не получали. С 11 дня исследования животным обоих групп добавили симптоматическую терапию. Подкожно вводили 0,9% раствор натрия хлорида в дозе 2,0 мл и одновременно 2,5 мл 5% раствора глюкозы. Внутримышечно 2 раза в сутки гептрал в дозе 0,15 мл на голову и 0,1 мл тиотриазолина. Также, 2 раза в сутки внутримышечно вводили по 0,5 мл цианокобаламина на голову. Схема опыта представлена в таблице 1.

После введения яда для крыс с кормом первые симптомы ожидали к 8-10 дню исследования. Но первые симптомы проявились у животных обоих групп к 5 дню исследования. Поэтому проведение терапии витаминным антидотом началось с первых клинических признаков отравления. Через 5 дней всем животным, оставшимся в живых, добавили препараты симптоматической терапии (гептрал, тиотриазолин, цианкобаламин, подкожно раствор глюкозы 5% концентрации, в сочетании с 0,9% раствором натрия хлорида).

Таблица 1 Схема опыта

Схема лечения	Контроль, n=10	Опыт, n=10
Корм Little-one-rats 2 раза в день, поение из автопоилки вволю	+	+
С 5 дня Витамин К1 (конакион) 0,1 мл на гол. внутрь индивидуально	-	+
С 10 дня внутримышечно 2 раза в сутки: Цианокобаламин 0,5 мл + Гептрал 0,15 мл + Тиотриазолин 0,1 мл; дополнительно подкожно 0,9% раствор натрия хлорида 2,0 мл с 5% раствором глюкозы 2,5 мл	+	+

Тиотриазолин - это антиоксидантный препарат (действующее вещество - морфолиний-метил-триазолин-тиоацетат), обладающий гепа-тостабилизирующим эффектом, уменьшающий проницаемость мембраны гепатоцитов для жиров, препятствующий распространению центролобулярных некрозов печени и способствующий процессам гепатопротекции.

Гептрал (адеметионина 1,4-бутандиосульфонат, L-лизин) является гепатопротектором, препятствует подавлению функции гепатоцитов, обладает детоксикационными, регенерирующими, антиоксидантными, антифиброзирующими и нейропротекторными свойствами.

Витамин В12 (цианокобаламин) оказывает благоприятное влияние на функцию печени и нервной системы, окислительно-восстановительные процессы, углеводный и жировой обмен, усиливает резистентность, активизирует свертывающую систему крови.

Раствор глюкозы (5%) - это средство для регидратации и дезинтоксикации, способствует улучшению окислительно-восстановительных процессов в организме, обновляет антитоксическую функцию печени, компенсирует часть энергетических затрат организма, а введение растворов глюкозы частично восполняет водный дефицит.

Раствор натрия хлорида (0,9%) - это дезинтоксикационное, гидратирующее, заменяющее плазму средство, которое нормализует кислотно-щелочное состояние.

При проведении исследований было установлено, что клинические признаки отравления проявляются на 4 дня раньше, чем описано в литературных источниках. По данным ранее проведенных исследований летальный исход наступает на 8-10 день отравления.

Фактически в период проведения исследования (экспериментального отравления) у животных при клиническом осмотре наблюдали: вялость, у некоторых крыс апатию, кровоизлияния на лапках, у одних геморрагии - на слизистой оболочке носа, у других - на слизистой оболочке ротовой полости, зафиксированы множественные подкожные, внутрикожные и подслизистые кровоизлияния. Отмечали парез и паралич одной или обеих тазовых конечностей, что соответствует данным литературных источников [3, 6]. Кал был черного цвета, моча с примесями крови. С этого же дня начали курс терапии витаминным ^ антидотом. Смертность у животных после отравления распределялась неравномерно в течение всего периода исследования.

После летального исхода лабораторных крыс проводили патолого анатомическое вскрытие для определения макрокартины отравления. При внешнем осмотре трупов слизистые ротовой полости и глаз бледные с точечными и полосчатыми кровоизлияниями, из носовой полости кровянистые истечения. На коже и под кожей видны множественные кровоизлияния. При патологоанатомическом вскрытии в грудной и брюшной полостях отмечено значительное скопление геморрагического экссудата, общим объемом до 50 мл. На месте кровоизлияний в подкожной клетчатке и мышцах гематомы различной величины с несвернувшейся кровью. При осмотре внутренних органов гематомы в эпикардиальной части миокарда, печени, селезенке и почках, а также в слизистых оболочках желудка и кишечника. Ткань легких значительно пропитана несвернувшейся кровью.

Динамика сохранности поголовья и определения процента летальности лабораторных животных по группам при экспериментальном отравлении представлена в таблице 2. За весь период исследования в контрольной группе зарегистрирована 100% гибель животных, а в опытной группе - летальный исход у 40% животных, но после примененного лечения с использованием витаминного антидота выживаемость лабораторных животных увеличилась (рисунок 1).

Таблица 2 Смертность крыс от отравления бромдиалоном в условиях эксперимента

Дни исследования	Контроль		Опыт
	голов	%	голов	%
5 день - живые, c клиническими признаками отравления	10	100	10	100
7 день - пало	4	40	2	20
9 день - пало	2	20	1	10
11 день - пало	1	10	1	10-
13 день, пало	1	10	-	-
30 день, пало	2	20	-	-
Всего пало	10	100	4	40

Проанализировав данные таблицы 2, можно констатировать, что проведение дополнительной терапии с 10 дня исследования с применением симптоматических средств способствовало снижению уровня интоксикации и быстрейшему восстановлению организма после отравления. Использование только симптоматической терапии не обеспечивает полного восстановления организма, но может продлевать период жизни. Сочетанное использование антидота и симптоматического лечения предотвращает летальный исход.

При вскрытии павших крыс из обеих групп были установлены признаки геморрагического диатеза с кровоизлияниями в печени, селезенке, легких, почках и слизистой оболочке ротовой полости, желудка и кишечника. Патологоанатомические признаки присутствовали на протяжении всего периода исследования.

Сохранность в эксперименте составила 60% в опытной группе при использовании в качестве антидота витамина К1 (конакион). Полностью восстановление поведения и исчезновение клинических признаков отравления произошло через 30 дней.

Рис. 1. Динамика летальности у крыс при экспериментальном отравлении

При оценке терапевтической и экономической эффективности можно определить её по затратам на лечение непродуктивных животных и по выживаемости животных. Оценку экономической эффективности в эксперименте проводили по затратам на лечение. Стоимость схемы лечения на контрольную группу крыс составила 683 рубля, на опытную - 2 166 рублей, при эффективности схемы 60%. Эффективность можно повысить за счет более раннего назначения антидота, если известно, что животное отравилось. При смешанной клинической картине отравления обращать внимание на скорость свертывания крови.

Заключение. На основании проведенных исследований установлено, что оптимальные сроки восстановления после отравления бромдиалоном составляют 30-32 дня, при этом летальность без лечения или с опозданием в лечении составляет 100%, а при лечении витаминным антидотом К1 - 40%. Использование только симптоматической терапии не обеспечивает полного восстановления организма, но явно может продлевать период жизни, сочетанное использование антидота и симптоматического лечения предотвращает летальный исход. Для повышения процента выживаемости антидотную и симптоматическую терапию необходимо начинать сразу с подозрения на отравление, учитывая время свертывания крови.

Список литературы:

1. Ветеринарная токсикология: учеб.-методич. пособие/ Ф.А. Медетханов, Д.Д. Хайруллин, Л.А. Муллакаева и др.// КГАВМ им. Н.Э. Баумана. 2017. 133 с.

2. Войцеховский В.В., Заболотских Т.В., Целуйко С.С. Приобретенные коагулопатии, обусловленные дефицитом витамин-К-зависимых факторов свертывания крови// Амурский медицинский журнал. 2019. № 1 (25). C. 59-71.

3. Галстян Г.М. Применение концентратов протромбинового комплекса по утвержденным и неутвержденным показаниям: новые перспективы старых препаратов// Гематология и трансфузиология. 2018. Т. 63. № 1. С. 78-91.

4. Енин А.В. Особенности диагностики и лечения отравления собак родентицидами// Научный вестник ГОУ ЛНР «Луганский национальный аграрный университет». 2018. № 3. С. 175-181.

5. Захарова Г.В., Пашовкина Р.Н., Краснова Р.Р. Варфарин и его аналоги -антикоагулянты кумаринового ряда в судебно-химическом и химико-токсикологическом анализе// Судебная медицина. 2019. № S1. С. 120-121.

6. Зименков В.А., Ибишов Д.Ф. Практическое использование антидотов при отравлениях мелких домашних животных (обзор)// Известия ОГАУ. 2019. № 4 (78). С. 178-181.

7. Ибишов Д.Ф., Зименков В.А. Терапия собак при отравлении изониазидом и антикоагулянтными родентицидами// Пенитенциарная система и общество: опыт взаимодействия. Пермский институт ФСИН. 2019. С. 19-21.

8. Ивлева Е.А., Богомолов Д.В., Путинцев В.А., Букешов М.К. Особенности морфологических проявлений переживания отравления родентицидом// Декабрьские чтения по судебной медицине. РУДН. 2017. С. 38-41.

9. Коагулопатия при интоксикации родентицидами - антагонистами витамина К/ В.В. Войцеховский, А.В. Пивник, Е.А. Филатова, Т.В. Есенина, К.М. Мишкурова, Н.А. Федорова// Бюл. физ. и пат. дых. 2020. № 78. С. 161177.

10. Случай массового отравления антикоагулянтными родентицидами/ Г.М. Галстян, И.Л. Давыдкин, А.С. Николаева, Н.И. Вехова, Ж.Е. Павлова, И.С. Пономаренко, Е.Е. Клебанова, В.Г. Савченко// Гематология и трансфузиология. 2020. № 2 (65). С. 174-189.

11. Шерешкова С.Е., Коваленко П.С. Эффективность модифицированных родентицидных приманок// Российский журнал Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. 2021. № 4 (40). С. 436-440.

12. Bahouth M.N., Kraus P., Dane K., Plazas Montana M., Tsao W., Tabaac B., Jasem J., Schmidlin H., Einstein E., Streiff M.B., Shanbhag S. Synthetic cannabinoid-associated coagulopathy secondary to long-acting anticoagulant rodenticides: Observational case series and management recommendations// Medicine (Baltimore). 2019. Vol. 98. 36. 17015.

13. Devgun J.M., Rasin A., Kim T., Mycyk M.B., Bryant S.M., Wahl M.S., DesLauriers C., Navon L., Moritz E.D., Thompson T.M., Swoboda H.D., Lu J., Aks S.E. An outbreak of severe coagulopathy from synthetic cannabinoids tainted with Long-Acting anticoagulant rodenticides// Clin. Toxicol. (Phila). 2019. Vol. 4. P. 1-8.

14. Feinstein D.L., Nosal D.G., Ramanathan S., Zhou J., Chen L., Hershow R.C., van Breemen R.B., Wright E., Hafner J.W., Rubinstein I. Effects of vitamin K1 treatment on plasma concentrations of long-acting anticoagulant rodenticide enantiomers following inhalation of contaminated synthetic cannabinoids// Clin. Toxicol. (Phila). 2020. Vol. 58. № 7. P. 716-724.

15. Wojciechowski V.V., Calina D., Tsarouhas K., Pivnik A.V., Sergievich A.A., Kodintsev V.V., Filatova E.A., Ozcagli E., Docea A.O., Gofita E., Arsene A.L., Tsitsimpikou C., Tsatsakis A.M., Golokhvast K.S. A guide to acquired vitamin K coagulophathy diagnosis and treatment: the Russian perspective// DARU Journal of Pharmaceutical Sciences. 2017. Vol. 25.

Резюме. Ветеринарная практика все чаще сталкивается с вопросами интоксикации у животных, связанной с отравлениями ядовитыми растениями, опасными родентицидами и другими токсикантами. В современных условиях неадекватного использования родентицидов, активность дог-хантеров приводит к острым отравлениям собак, иногда и кошек. Своевременное установление причины нездоровья животных - это успешное лечение и сохранение жизни. Когда известна причина, терапия более успешна. Подбор эффективной схемы зависит от многих факторов: времени и эффективности самих лекарственных средств. В статье представлены результаты экспериментальных исследований на лабораторных животных при отравлении родентицидом -бромдиалоном. В ходе исследования авторами установлена максимальная эффективность витаминного антидота при отравлении бромдиалоном. В период проведения исследования применяли клинические, патологоанатомические и статистические методы. В исследованиях определяли клинические симптомы, патологоанатомические изменения у павших, смертность и выживаемость при различных схемах лечения. Определяли выживаемость животных в зависимости от начала антидотной терапии. Исследования проводились на белых беспородных крысах в возрасте 4-6 месяцев, живой массой 360 г, в условиях лаборатории кафедры инфекционной и незаразной патологии Уральского госагроуниверситета. Новизна исследования заключается в экспериментальном доказательстве терапевтической эффективности по количеству выживших животных при экспериментальном отравлении лабораторных крыс, взаимосвязи выживаемости и скорости проведения антидотной терапии. Полученные результаты исследования помогут практическим ветеринарным врачам делать правильный выбор антидотной терапии и максимально сохранять жизнь животным. Кроме этого, необходимо учитывать временной интервал от отравления до лечения с целью правильного определения прогноза и тактики лечения.

Ключевые слова: родентициды, отравления, бромдиалон, летальный исход, антидоты, витамин К, симптоматическая терапия, антидотная терапия, лабораторные животные, белые крысы.

Сведения об авторах:

Дрозд Марья Николаевна, старший преподаватель кафедры инфекционной и незаразной патологии ФГБОУ ВО «Уральский государственный аграрный университет»; 620075, г. Екатеринбург, ул. Карла Либкнехта, 42; e-mail: umn100@yandex.ru.

Усевич Вера Михайловна, кандидат ветеринарных наук, доцент, заместитель заведующего кафедрой инфекционной и незаразной патологии ФГБОУ ВО «Уральский государственный аграрный университет»; 620075, г. Екатеринбург, ул. Карла Либкнехта, 42; e-mail: vus5@yandex.ru.

Бурцева Татьяна Владимировна, кандидат педагогических наук, доцент кафедры инфекционной и незаразной патологии ФГБОУ ВО «Уральский государственный аграрный университет»; 620075, г. Екатеринбург, ул. Карла Либкнехта, 42; e-mail: burceva72@inbox.ru.

Ответственный за переписку с редакцией: Баркова Анна Сергеевна, доктор ветеринарных наук, заведующий кафедрой производства и экспертизы качества сельскохозяйственной продукции ФГБОУ ВО «Калининградский государственный технический университет»; 236022, г. Калининград, ул. Калязинская, 4; тел.: 8-4012-955618; e-mail: barkova.as@mail.ru.

	Полезные ссылки
Департамент ветеринарии Краснодарского края Ассоциация Практикующих Ветеринарных Врачей