Доклинические исследования гепатопротекторных кормовых добавок для особо ценных видов рыб, используемых в современной аквакультуре

УДК 619:615.4 / 619:615.9
DOI 10.33861/2071-8020-2025-3-42-45

Оригинальное эмпирическое исследование

Абрамов А. А., Семененко М. П., Кузьминова Е. В., Юрин Д. А., Железнякова К. А. ФГБНУ «Краснодарский научный
центр по зоотехнии и ветеринарии», г. Краснодар
Калошкина И. М. государственное казенное учреждение Краснодарского края «Краснодарская краевая станция
по борьбе с болезнями животных», г. Краснодар

Аннотация. В статье описан эксперимент по определению безвредности двух гепатопротекторных кормовых добавок путем изучения показателей острой токсичности на целевых гидробионтах (стерляди и радужной форели). Кормовые добавки задавались опытным и контрольным живым объектам однократно внутрижелудочно с помощь специализированного атравматичного пищеводного зонда в установленных по группам диапазонах доз. В ходе исследований было определено, что комбинированная кормовая добавка с гепа-топротекторными свойствами и кормовая добавка ГлинМакс не оказывают токсического воздействия на организм целевых видов рыб и по результатам токсикологических экспериментов относятся к 4 классу опасности (ГОСТ 12.1.007-76 «Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности»). В группах гидробионтов, где применялись кормовые добавки, за 14 дней периода наблюдений прирост массы тела был выше показателей контрольных групп в среднем на 7,1-18,7 %.

Ключевые слова: аквакультура, острая токсичность, стерлядь, радужная форель, патологии печени, гепатопротекторы, кормовые добавки.

Согласно данным ФАО (продовольственная и сельскохозяйственная организация Объединенных Наций) в настоящее время население планеты потребляет в год более 150 млн. тонн продукции, производимой водными экосистемами, из них около 90 млн. тонн - аквакультурой. Наиболее распространенным объектом аквакультуры является рыба (искусственно выращивается в настоящее время более 100 видов рыб), поэтому рыбоводство - наиболее развитая отрасль аквакультуры, особенно пресноводной.

В конце 90-х годов прошлого и в первом десятилетии нынешнего столетия наблюдалось заметное снижение добычи морской и океанической рыбы и вылова рыбы во внутренних водоемах России, что привело к существенному уменьшению среднедушевого потребления рыбы населением. При физиологической норме потребления 23,7 кг на человека в год фактическое потребление составило, к примеру, в 2006 году менее 10 кг. По оценкам специалистов снижение душевого потребления рыбы до 5-10 кг представляет собой угрозу здоровью россиян и значительно может повлиять на уровень продовольственной безопасности нашего государства. Условия, сложившиеся в естественных водоемах страны в результате хозяйственной деятельности человека, привели к уменьшению объема воспроизводства и промысла ценных видов рыб. Объем производства пресноводной рыбы в стране не удовлетворял потребности населения. Для стабилизации ситуации на отечественном рыбном рынке необходимо было увеличить производство продукции отрасли в несколько раз [7, 8].

Рыбоводство в России сегодня, особенно в южных ее регионах, находится на стадии активного возрождения и модернизации своих возможностей. Широко распространяются новые современные и технологичные производственные линии (каскады бассейнов, различные установки замкнутого водоснабжения как средне потребительского, так и индустриального масштаба). Исчерпаемость возможностей рыбоводства в естественных водоемах привела к стихийному увеличению числа предприятий, занимающихся искусственным рыборазведением с уклоном на существенное уменьшение сроков выращивания и улучшение товарных характеристик конечного продукта [4].

Таким образом, на первый план для каждого рыбовода выходят вопросы интенсивного кормления как важнейшая часть технологического процесса, призванная обеспечить получение продукта требуемого качества в кратчайшие сроки. С данным вопросом неплохо справляются полнорационные гранулированные корма, выпускаемые по возрастам для разных видов рыб. Однако санкционная политика ряда стран, из которых шли ка чественные корма проверенных производителей, практически перекрыла импорт рыбных кормов, а зачастую, и сырья для их производства, что привело к стихийному появлению отечественных аналогов пока более низкого качества, чем импортные оригиналы [1, 3].

При интенсивных методах кормления, где практически 100 % продукции получают за счет полнорационных комбикормов, возникает ряд обменных патологий, вызванных неполноценностью или недоброкачественностью компонентов ПК, нарушениями технологии выращивания, физиологически неверным режимом кормления [2]. Наиболее уязвимой системой для пагубных воздействий такого рода является гепатобилиарная, обеспечивающая постоянство внутренней среды организма, выполняющая множество эндокринных и экзокринных функций, в том числе детоксикацию экзо- и эндотоксинов [5].

Поэтому для обеспечения населения качественной отечественной рыбной продукцией необходимо развитие методов и средств ветеринарного обеспечения рыбоводческих хозяйств. В частности, разработка и применение гепатозащитных кормовых добавок, созданных из отечественных компонентов преимущественно природного происхождения, способных нивелировать негативные последствия интенсивного кормления, обеспечить сохранение высоких ростовых характеристик и качество получаемой продукции рыбоводства [9].

Целью настоящего исследования явилось определение степени безвредности двух гепатопротекторных кормовых добавок для объектов аквакультуры, разработанных учеными Краснодарского научного центра по зоотехнии и ветеринарии. Токсикологические исследования новых фармакологических средств критически важны для обеспечения безопасности животных и человека. Они позволяют выявить возможные негативные воздействия на здоровье животных при потреблении исследуемого средства, а также оценить риск попадания вредных веществ в пищевую цепочку [6].

Материалы и методы исследований. Для оценки общетоксических свойств разработанных кормовых добавок был проведен эксперимент по определению их острой токсичности на целевых гидробионтах (молоди стерляди - массой 119 - 134 г, и годовиках радужной форели - массой 418 - 446 г). Представленные эксперименты были проведены в соответствии с «Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» под общей редакцией проф. Р.У. Хабриева (2005), «Руководством по проведению доклинических исследований лекарственных средств» (часть первая) под редакцией А.Н. Миронова (2012), Правилами проведения доклинического исследования лекарственного средства для ветеринарного применения (Приказ Минсельхоза РФ от 6 марта 2018 г. №101 «Об утверждении Правил проведения доклинического исследования лекарственного средства для ветеринарного применения, клинического исследования лекарственного препарата для ветеринарного применения, исследования биоэквивалентности лекарственного препарата для ветеринарного применения), ГОСТ 12.1.007-76 «Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности» [6].

Объекты исследования: Комбинированная кормовая добавка с гепатопротекторными свойствами (КД 1) - комплексное средство, представляющее собой однородный сыпучий порошок от светло-желтого до серо-желтого цвета без выраженного запаха. Не гигроскопичен. С водой образует суспензию. Основной упор при выборе компонентов был направлен на природные соединения, содержащие в своем составе высокую концентрацию естественных флавоноидов и других гепатотропных веществ преимущественно природного происхождения.

Кормовая добавка ГлинМакс (КД 2) - комплексное средство, представляющее собой однородную темно-коричневую массу со специфическим запахом, растворимую в воде. Состав проявляет гепатопротекторное действие благодаря наличию жидкого бетаина и кедровых орехов, а также эссенциальных кислот.

Опыт на целевых гидробионтах проводился в аквариальной зоне вивария Краснодарского НИВИ. В эксперименте участвовало 30 стерлядей, разделенных на 3 группы по 5 особей (2 опытные и 1 контрольная) на каждую из кормовых добавок, и 30 радужных форелей, разделенных на группы аналогичным способом. Каждая группа содержалась отдельно в бассейнах для УЗВ объемом 100 л (рисунок 1). Рыба для эксперимента была предоставлена инновационно-технологическим центром аквакультуры Кубанского госагроуниверситета.

Рис. 1. Содержание опытных и контрольных гидробионтов в период проведения эксперимента

Исследуемые образцы кормовых добавок вводились стерляди и форели однократно в виде 20-30% водной суспензии при помощи атравматичного пищеводного зонда непосредственно в желудок (рисунок 2, 3).

Рис. 2. Введение образца кормовой добавки ГлинМакс (КД 2) в ЖКТ молоди стерляди

Рис. 3. Введение образца комбинированной кормовой добавки с ге-патопротекторными свойствами (КД 1) в ЖКТ радужной форели

Целью экспериментов было установление переносимости высоких доз кормовых добавок целевыми гидробионтами, поэтому в данном тесте использовался следующий диапазон доз: для комбинированной кормовой добавки с гепатопротекторны-ми свойствами (КД 1): на стерляди - 7,1-5,6 г/кг, на форели -6,8-5,2 г/кг; для кормовой добавки ГлинМакс (КД 2): 6,0-5,1 г/кг, на форели - 7,0-5,3 г/кг. Перед внутрижелудочным введением гидробионты выдерживались на голодной диете 24 часа. Рыбе контрольной группы вводилась дистиллированная вода в объеме 5,0 мл на каждую особь.

Общая продолжительность наблюдения составила 14 суток. Учет и регистрация параметров жизнедеятельности осуществлялись ежедневно и индивидуально по каждой особи, участвующей в эксперименте [6]. При этом оценка состояния гидробионтов в течение первых суток проводилась в виде непрерывного наблюдения. Далее осуществлялась регулярная визуальная клиническая оценка общего состояния рыбы - внешние покровы (чешуя, слизь, плавники, кожа), жабры, глаза, поведение, внешний вид (сохранение нормальной формы тела или же наличие деформаций и вздутий).

Учет массы тела стерляди и форели проводили индивидуально до начала исследования в день дачи кормовых добавок и каждые последующие 7 дней экспериментального периода (3 взвешивания).

Результаты исследований и их обсуждение. На основании проведенных исследований при однократном введении образцов кормовых добавок КД 1 и КД 2 установлено отсутствие гибели гидробионтов в течение всего периода наблюдений.

Наблюдение за гидробионтами в постинтоксикационный период острого эксперимента не выявило значимых различий между состоянием рыбы опытных и контрольной групп как стерляди, так и радужной форели. В течение 5-15 минут у опытных и контрольных стерлядей и 10-20 минут у радужной форели из всех групп наблюдалась кратковременная дезориентация и боковое плавание у поверхности воды. Далее состояние рыбы нормализовалось, поэтому мы связываем природу данного явления со стрессом, вызванным манипуляциями по введению образцов кормовых добавок, и соответственно кратковременным недостатком кислорода в ходе проведения зондирования рыбы на воздухе.

Спустя 20 минут после введения образцов кормовых добавок состояние всех особей стерляди и радужной форели соответствовало физиологической норме вида: чистая естественно ослизненная поверхность тела, блестящая чешуя, плотно прилегающая к телу (у форели); кожа и состояние костных пластинок в норме (у стерляди); грудные, брюшные, спинной, анальный и хвостовой плавники не деформированы, без видимых повреждений; окраска естественная, присущая данным видам рыб; глаза выпуклые, прозрачные, с блестящей роговицей; жабры красные, влажные, без слизи и посторонних включений; брюшко слегка вздутое (в течение первых суток после зондирования), без признаков воспаления.

При дальнейшем наблюдении за гидробионтами (в течение 14 дней) существенных различий в клиническом состоянии опытных и контрольных особей зафиксировано не было, их состояние соответствовало видовой и возрастной норме.

Измерение масс тела рыбы опытных и контрольных групп стерляди и радужной форели в контрольных точках эксперимента (перед введением, на 7 и 14 сутки опыта) выявило увеличение прироста их массы тела. Средние ростовые показатели опытной рыбы к концу периода наблюдений не имели существенной разницы с контролем, однако показатели прироста массы тела у рыбы, получавшей кормовые добавки (в среднем по опытным группам), были выше значений контроля: в группах с КД 1 - по стерляди - на 18,7%, по форели - на 13,1%; в группах с КД 2 - по стерляди - на 18,3%, по форели - на 7,1% (табл. 1).

Таблица 1 Динамика массы тела гидробионтов в эксперименте по определению острой пероральной токсичности кормовых добавок КД 1 и КД 2

Группы	1 день опыта	7 день опыта	14 день опыта	При­рост
Пероральное введение образца (M±m; n=5)
КД 1 (стерлядь)
Контрольная	123,1±3,79	127,7±3,31	130,0±2,93	5,61
Опытная 1	126,4±4,35	131,1±3,71	134,5±3,83	6,41
Опытная 2	124,7±4,23	129,2±4,11	133,3±4,02	6,90
КД 1 (радужная форель)
Контрольная	428,5±9,63	438,7±9,31	446,9±9,17	4,29
Опытная 1	430,1±10,76	439,9±10,33	450,8±10,43	4,81
Опытная 2	432,6±12,53	441,1±12,71	453,7±12,32	4,88
КД 2 (стерлядь)
Контрольная	127,5±3,48	131,3±3,17	134,6±3,27	5,57
Опытная 1	125,9±4,76	229,8±4,55	133,9±4,21	6,35
Опытная 2	128,7±4,83	133,6±4,35	137,5±4,11	6,83
КД 2 (радужная форель)
Контрольная	434,7±10,53	444,9±10,91	454,3±10,53	4,51
Опытная 1	432,5±9,76	441,4±9,91	452,9±10,07	4,72
Опытная 2	433,7±11,03	444,2±10,82	455,1±10,61	4,93

Объективных признаков интоксикации входе 14 дневного периода наблюдений не было установлено ни у одного из подопытных живых объектов. LD100 и LD50 не были определены, так как падеж не был зафиксирован ни в одной из опытных групп.

Заключение. Проведенными экспериментальными исследованиями острой токсичности установлено, что однократное вну-трижелудочное введение молоди стерляди и радужной форели возможных токсических доз исследуемых образцов комбинированной кормовой добавки с гепатопротекторными свойствами (КД 1) и кормовой добавки ГлинМакс (КД 2) не вызывает гибели, не оказывает выраженного токсического действия на клиническое состояние и динамику массы тела опытных живых объектов. В связи с этим для данных кормовых добавок абсолютная LD100 и средняя LD50 летальные дозы не определены.

Данные токсикометрии, а также наблюдения за гидробионтами на протяжении 14 суток в постинтоксикационном периоде острого отравления по ГОСТ 12.1.007-76 «Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности» позволяют отнести кормовые добавки КД 1 и КД 2 к 4 классу опасности (вещества малоопасные).

Список литературы:

1. Абрамов А. А. Оценка влияния новой гепатопротекторной кормовой добавки на биохимические маркеры крови молоди стерляди / А. А. Абрамов, М. П. Семененко, Е. В. Кузьминова, Е. В. Рогалева // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2024. - Т. 260, № 4. - С. 16-21. - DOI 10.31588/2413_4201_1883_4_260_16.

2. Абрамов А. А. Гепатозащитные свойства гепрасана-Нео в эксперименте по профилактике гепатопатий у молоди янтарной форели / А. А. Абрамов, М. П. Семененко, К. А. Семененко // Вестник Марийского государственного университета. Серия: Сельскохозяйственные науки. Экономические науки. - 2024. - Т. 10, № 2(38). - С. 117-125. - DOI 10.30914/2411-9687-2024-10-2-117-125.

3. Басанкин А. В. Анализ проявления различных стресс-факторов на организм рыбы и возможность их фармакокоррекции в условиях современного рыбоводства / А. В. Басанкин, М. П. Семененко, В. М. Басанкина // Сборник научных трудов Краснодарского научного центра по зоотехнии и ветеринарии, 2022. - Т. 11. - № 1. - С. 226229. DOI: 10.48612/sbornik-2022-1-56.

4. Короткий В. П. Влияние введения новых кормовых добавок в рацион стерляди на ее продуктивность / В. П. Короткий, Е. А. Максим, Д. А. Юрин [и др.] // Зоотехния. - 2024. - № 4. - С. 18-21. - DOI 10.25708/ZT.2024.39.42.005.

5. Кузьминова Е. В. Перспективы расширения спектра применения гепатопротекторов в ветеринарии / Е. В. Кузьминова, М. П. Семененко, Е. А. Старикова и др. // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета. - 2014; 102. - С. 787-797.

6. Пархоменко С. А. Параметры острой токсичности препарата, предназначенного для применения в аквакультуре / С. А. Пархоменко, А. А. Абрамов, Е. В. Кузьминова // Ветеринария Северного Кавказа. -2025. - № 10. - С. 289-301. - DOI 10.24412/cl-37120-2025-10-289-301.

7. Туктарова Э. А. Сравнительная оценка роста молоди осетровых в различных условиях выращивания / Э. А. Туктарова, Л. М. Сафиуллина, Э. И. Латипова [и др.] // Международный научно-исследовательский журнал. - 2015. - № 10-3(41). - С. 70-73. DOI 10.18454/ IRJ.2015.41.196.

8. Юрин Д. А. Применение новой кормовой добавки при выращивании рыб в бассейнах / Д. А. Юрин, Е. А. Максим, Н. В. Агаркова [и др.] // Сборник научных трудов Краснодарского научного центра по зоотехнии и ветеринарии. - 2024. - Т. 13, № 1. - С. 116-119. - DOI 10.48612/sbornik-2024-1-26.

9. Юрин Д. А. Использование фитодобавки в кормлении осетровых рыб / Д. А. Юрин, Д. В. Осепчук, Н. А. Юрина [и др.] // Сборник научных трудов Краснодарского научного центра по зоотехнии и ветеринарии. - 2020. - Т. 9. - № 1. - С. 198-203. DOI 10.34617/v45w-aa73.

Сведения об авторах:

Семененко Марина Петровна, доктор ветеринарных наук, доцент, заведующая отделом фармакологии ФГБНУ «Краснодарский научный центр по зоотехнии и ветеринарии»; 350004, г. Краснодар, ул. 1-я Линия, 1; тел.: 8-918-461-26-63; e-mail: sever291@mail.ru.

Кузьминова Елена Васильевна, доктор ветеринарных наук, доцент, главный научный сотрудник отдела фармакологии ФГБНУ «Краснодарский научный центр по зоотехнии и ветеринарии»; 350004, г. Краснодар, ул.1-я Линия, 1; тел.: 8-918-419-83-69; e-mail: niva1430@mail.ru.

Юрин Денис Анатольевич, кандидат сельскохозяйственных наук, заведующий отделом технологии животноводства ФГБНУ «Краснодарский научный центр по зоотехнии и ветеринарии»; 350004, г. Краснодар, пос. Знаменский, ул. Первомайская, 4; тел. 8-918-480-61-44; e-mail: 4806144@mail.ru.

Железнякова Ксения Андреевна, кандидат экономических наук, старший научный сотрудник отдела фармакологии ФГБНУ «Краснодарский научный центр по зоотехнии и ветеринарии»; 350004, г. Краснодар, ул. 1-я Линия, 1; тел.: 8-918-444-22-42; e-mail: ksenia.andreevna0708@gmail.com.

Калошкина Инна Муратовна, кандидат ветеринарных наук, начальник отдела противопаразитарных, ветеринарно-санитарных мероприятий ГКУ КСББЖ «Краснодарская»; 350004, г. Краснодар, ул. имени Калинина, 15/1; e-mail: beretarinna@gmail.com.

Ответственный за переписку с редакцией: Абрамов Андрей Андреевич, кандидат ветеринарных наук, ведущий научный сотрудник отдела фармакологии ФГБНУ «Краснодарский научный центр по зоотехнии и ветеринарии»; 350004, г. Краснодар, ул. 1-я Линия, 1; тел.: 8-902-406-15-27; e-mail: abramov1527@mail.ru.

Вклад авторов:

Абрамов А.А.: формальный анализ, проведение исследования, валидация результатов, визуализация, написание черновика рукописи.

Семененко М.П.: разработка концепции, курирование данных, разработка методологии, административное руководство исследовательским проектом, предоставление ресурсов, научное руководство, валидация результатов, визуализация, написание рукописи - рецензирование и редактирование.

Кузьминова Е.В.: разработка концепции, курирование данных, разработка методологии, административное руководство исследовательским проектом, предоставление ресурсов, научное руководство, визуализация, написание рукописи - рецензирование и редактирование.

Юрин Д.А.: формальный анализ, проведение исследования, валидация результатов, визуализация, написание черновика рукописи.

Железнякова К.А.: формальный анализ, проведение исследования, валидация результатов, визуализация, написание черновика рукописи.

Калошкина И.М.: валидация результатов, визуализация, написание рукописи - рецензирование и редактирование.

Конфликт интересов: авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

	Полезные ссылки
Департамент ветеринарии Краснодарского края Ассоциация Практикующих Ветеринарных Врачей