Гематологические проявления бабезиоза у собак разных возрастных групп

УДК: 619:616.928.7:636.7
DOI 10.33861/2071-8020-2023-3-51-53

Беспалова Н. С., Шабунин Б. В., Крутов И. О. Федеральное государственное бюджетное
образовательное учреждение высшего образования «Воронежский государственный аграрный
университет имени императора Петра I», г. Воронеж

Бабезиоз представляет собой опасное облигатно-трансмиссивное заболевание, вызываемое микроорганизмами рода Babesia. Заражение бабезиями происходит после укуса животных и людей переносчиками бабезиоза — иксодовыми клещами.

В роду Babesia насчитывается до 100 видов. Было доказано, что каждый вид зачастую специфичен для определенного животного. У собак наиболее часто выявляют Babesia canis, Babesia gibsoni. Собаки являются промежуточными хозяевами паразита и в их организме происходит бесполое размножение. Паразит поражает эритроциты, после выхода из клетки выделяются продукты жизнедеятельности микроорганизмов, которые являются очень токсичными для животного.

Бабезиоз распространен в основном на северо-западе, юге и в центральной части России. Инвазию характеризуют как сезонное заболевание, что непосредственно связано с сезонностью активности иксодовых клещей. Пики заболеваемости приходятся на начало апреля — середину мая и конец августа — середину октября.

Бабезиоз часто сопровождается анемией, поражением внутренних органов (печени и почек), гемоглобинурией. Эти патологические процессы уменьшают процент выздоровления у собак старшего возраста и увеличивают процент летальности в конкретных клинических случаях.

Всё же несмотря на широкую распространенность бабезиоза собак, в литературе практически отсутствуют данные о его течении и проявлениях у животных разного возраста. В то же время возраст животного играет большую роль при прогнозировании течения и назначении эффективного лечения, именно поэтому изучение проявлений бабезиоза у собак разного возраста на данный момент является актуальным.

Целью данного исследования является изучение проявления бабезиоза у собак разных возрастных групп, а также выявление частоты отклонений морфологических показателей крови при помощи диаграмм.

Материалы и методы исследований. За основу была взята наша предыдущая работа, где выборка составляла 69 животных [2]. Для исследования были использованы данные морфологических анализов крови собак, спонтанно инфицированных бабезиозом с весны 2019 года до конца 2022 года. Для подтверждения диагноза применяли микроскопию мазка крови, который окрашивали по Романовскому. В 12% случаев понадобилась микроскопия обогащенного мазка крови. Кровь отбиралась в вакуумную пробирку со стабилизатором ЭДТА. Морфологический анализ крови выполнен на автоматическом анализаторе импедансного типа Hemascreen vet (Hospitex Diagnostics, Швейцария). Животные были разделены на 3 возрастные группы: в группу 1 (n = 165) вошли собаки до 2 лет включительно, в группу 2 (n = 97) отбирались собаки от 2 до 7 лет, а в группу 3 (n = 55) были подобраны животные возрастом 7 лет и старше. Статистический анализ проводился по Стьюденту, различия считались достоверными при p<0,05. Для статистического анализа использовали MS office excel с дополнительными пакетами для построения графиков распределения.

Результаты исследований и их обсуждение. При анализе данных исследования было показано, что в среднем количество лейкоцитов попадало в референсный интервал. Наибольшее количество лейкоцитов было в группе 2, однако не было выявлено достоверных различий между группами по данному показателю. Среднее количество лимфоцитов также не выходило за рамки физиологических значений во всех группах, но статистический анализ показал достоверно более низкое число данных клеток в группе 3. Аналогично лимфоцитам, среднее количество гранулоцитов принимало значения в пределах физиологических, но в группе 2 среднее количество лейкоцитов было на 20% выше чем в группе 1 и 3. Среднее количество эритроцитов во всех группах было ниже нормальных значений, особенно это было заметно в группе 1, где среднее значение было на 20% меньше нижней границы нормы. Анализ данных показал также достоверное уменьшение данного показателя в группе 1 относительно группы 2 и 3 на 15% и 14%, соответственно. Аналогично с эритроцитами, средняя концентрация гемоглобина в группе 2 и 3 находилась на нижней границе референсных значений, а в группе 1 наблюдалось понижение на 15%. Также статистический анализ показал достоверные различия в концентрации гемоглобина. Так, в группе 1 средняя концентрация гемоглобина была на 15% ниже, чем в группе 2 и 3. Среднее содержание гемоглобина в эритроцитах (далее, MCH) принимало физиологически нормальные значения во всех группах и не имело значимых различий между группами. Аналогичные данные были получены также при анализе среднего объема эритроцитов (далее, MCV). Среднее значение гематокрита во всех группах было ниже физиологических значений, что особенно было заметно в группе 1, где его среднее значение было на 26% ниже, чем нижняя граница нормы и на 13% ниже, чем в группе 2 и 3. Цветной показатель в группах 2 и 3 был ниже нормальных значений на 7%, а в группе 1 всего на 4% был выше нижней границы физиологической нормы. Среднее количество тромбоцитов во всех группах находилось близко к нижней границе нормальных значений. При этом, было показано, что в группе 2 количество тромбоцитов было достоверно выше, чем в группе 1 и 3 на 18% и 14%, соответственно (табл. 1).

Таблица 1 Анализ морфологических показателей крови собак, спонтанно инфицированных бабезиозом

Показатели	Норма	0 - 2 года	2 - 7 лет	Старше 7 лет
Лейкоциты * 109/Л	6-17	7,8 ± 0,29	8,5 ± 0,56	7,3 ± 0,53
Лимфоциты * 109/Л	0,9-3,4	1,9 ± 0,14	1,7 ± 0,17	1,4 ± 0,171, 2
Гранулоциты * 109/Л	3,0-9,2	5,2 ± 0,23	6,1 ± 0,511, 3	5,1 ± 0,44
Эритроциты * 1012/Л	5,5-8,5	4,3 ± 0,112, 3	5,1 ± 0,13	5,05 ± 0,16
Гемоглобин г/Л	110-190	98,7 ± 2,7 2, 3	117,7 ± 2,9	113,7 ± 3,8
MCH рд	20-25	22,8 ± 0,29	23,6 ± 0,38	22,6 ± 0,35
MCV fL	62-72	62,4 ± 0,54	62,4 ± 0,71	62,8 ± 0,63
Гематокрит %	39-56	28,1 ± 1,22, 3	32,4 ± 0,83	31,7 ± 1,0
Тромбоциты * 109/Л	117-460	117,4 ± 6,9	138,8 ± 9,4 1, 3	121,3 ± 7,7

- 1 p < 0,05 в сравнении с группой 0 — 2 года

- 2 p < 0,05 в сравнении с группой 2 — 7 лет

- 3 p < 0,05 в сравнении с группой 7+ лет

При анализе распределения значений было показано, что примерно у половины собак из групп 1 и 2 количество лейкоцитов было физиологически нормальным, в группе 3 нормальное количество было у 42% собак. В то же время в группе 3 было наибольшее количество собак с существенно сниженной концентрацией лейкоцитов, что видно на рисунке 1а.

Анализ количества лимфоцитов показал, что в группе 3 у 52% животных количество лимфоцитов было снижено, также в данной группе был самый низкий процент собак с нормальным количеством данных клеток. Наименьший процент собак с пониженным количеством лимфоцитов наблюдался в группе 1. В группе 2 процент собак со сниженным и физиологически нормальным количеством лимфоцитов был примерно равным. В то же время в группе 3 наблюдался самый большой процент собак с понижением (52%) и самый низкий процент с нормальными (37%) значениями лимфоцитов. Повышенное количество лимфоцитов наблюдалось в 18%, 13% и 12% в группе 1, 2 и 3, соответственно (рисунок 1б).

Анализ распределения значений количества гранулоцитов показал, что снижение их количества наблюдалось у 21% животных в группах 1 и 2, и у 31% собак в группе 3. Примерно у половины животных во всех группах количество гранулоцитов содержалось в промежутке 3,0-6,0*109/л. В то же время, в группе 1 и 2 у 16% и 19% животных, соответственно, количество гранулоцитов содержалось в промежутке 6,0-9,2*109/л, в группе 3 было всего 6% собак с таким же количеством гранулоцитов. Процент собак с повышенным количеством гранулоцитов во всех группах был почти одинаковым (рисунок 1в).

Рис. 1. Распределение значений лейкоцитов и их фракций (на оси абсцисс отмечены интервалы значений для каждого показателя в единицах измерения, представленных в таблице, на оси ординат отмечен процент животных из каждой группы, у которых значения исследуемого показателя попадают в интервал): а - распределение значений количества лейкоцитов; б - распределение значений количества лимфоцитов; в - распределение значений гранулоцитов

Для более точного анализа количества эритроцитов понадобилось 5 интервалов значений. Существенное снижение количества эритроцитов до количества менее 3,4*1012/л наблюдалось у 27% собак в группе 1 и у 11% в группах 2 и 3. Также у 26% собак в группе 1 данный показатель принимал значения в интервале 3,4-4,6х1012/л. В то же время в группах 2 и 3 процент собак с такими же значениями составлял примерно 20%. На рисунке 2а следует обратить внимание на промежутки 4,6-5,5 и 5,5-7,0. Видно, что собак, у которых количество эритроцитов входит в данные диапазоны больше чем в группе 1. Так, из-за того, что нормальное количество эритроцитов наблюдается лишь у 33% собак в группах 2 и 3, среднее значение данного показателя в этих группах ниже референсного интервала, представленного в таблице. Из рисунка 2б видно, что концентрация гемоглобина имеет прямую корреляцию с количеством эритроцитов, что также было показано при статистическом анализе (k=0,94). В группе 1 у 20% собак концентрация гемоглобина была существенно снижена до значений 4060 г/л. Также видно, что процент собак с нормальной концентрацией гемоглобина был заметно ниже относительно других групп и составил 42% относительно 59% в группе 2 и 62% в группе 3. Среднее содержание гемоглобина в эритроцитах (MCH) у большинства животных во всех группах принимало физиологически нормальные значения. Примерно у 14% исследованных собак наблюдалось повышение MCH, что в данном случае можно трактовать как компенсаторно-приспособительную реакцию организма (рисунок 2в). Анализ распределений значений гематокрита показал, что в группе 1 только у 8% собак данный показатель принимал нормальные значения, при этом у 52% животных наблюдалось снижение гематокрита до промежутка 20-29%. Это также подтверждается низким средним значением данного показателя в этой группе. У собак из группы 2 гематокрит ниже 29% наблюдался лишь у 26% животных. В 59% случаев в данной возрастной группе гематокрит принимал значения от 29% до 39% (рисунок 2г). Анализ значений тромбоцитов показал, что в группе 2 собаки были наименее подвержены тромбопении, что видно из 50% животных с нормальным количеством тромбоцитов (рисунок 2д).

Рис. 2. Распределение значений показателей (на оси абсцисс отмечены интервалы значений для каждого показателя в единицах измерения, представленных в таблице, на оси ординат отмечен процент животных из каждой группы, у которых значения исследуемого показателя попадают в интервал): а - распределение значений количества эритроцитов (а), гемоглобина (б), МСН (в), гематокрита (г) и тромбоцитов (д)

Предрасположенность к лейкопении у собак всех возрастов была примерно одинаковой. У 50-60% всех исследованных животных отмечали снижение количества лейкоцитов. R. Baric Rafaj и соавторы указывали, что механизм лейкопении может быть связан с повышенной трансэндотелиальной миграцией лейкоцитов из кровяного русла [4].

Анемии в наибольшей степени были подвержены собаки из группы 1, что видно как из графиков, так и из таблицы. Мы считаем, что такие различия связаны с отсутствием какого-либо иммунитета к бабезиям, в то время как собаки из других групп зачастую имеют нестерильный иммунитет к данному заболеванию, из-за чего симптомы проявляются менее выраженно. Полученные данные подтверждают исследования Акимова Д. Ю. и соавторов [1]. Механизм развития анемии обычно связывают с непосредственной деструкцией эритроцитов при выходе паразитов в кровяное русло.

Снижению общего количества тромбоцитов были подвержены в большей степени собаки из группы 1 и 3. Механизм развития тромбоцитопении при бабезиозе до конца не ясен. В исследовании Akel T. было показано, что тромбоцитопения развивается вследствие усиленной утилизации клеток в селезенке [3].

Содержание гемоглобина в эритроцитах практически не изменялось при бабезиозе у большинства исследованных собак, что может указывать на то, что бабезиоз не оказывает значимого влияния на эритропоэз.

Полученные данные о морфологических показателях крови подтверждают исследования европейских и российских ученых. Так, наиболее частыми проявлениями бабезиоза является гемолитическая анемия, лейкопения, тромбоцитопения, гипогемогло-бинемия. При этом, наиболее тяжело болезнь протекает у собак до 2 лет, а наименее - у взрослых собак до 7-8 лет. Однако наши данные о биохимическом составе крови собак при бабезиозе указывают, что среди собак до 2 лет было гораздо меньше животных со значимыми отклонениями в основных биохимических показателях. Следовательно, клинические симптомы заболевания проявляются раньше и болезнь не успевает нанести значимый ущерб обмену веществ [2, 5].

Представленная на рисунках информация всё же показывает, что в среднем у 30% животных не изменяется содержание эритроцитов. При этом концентрация гемоглобина остается нормальной у 60% собак старше 2 лет. При изучении морфологических показателей крови у животных также стоит обращать внимание на лимфопению при нормальном или повышенном количестве гранулоцитов. Подсчет количества тромбоцитов наиболее информативен у собак до 2 или старше 7 лет. Анализ гематокрита наиболее информативен для животных возрастом не более 2 лет.

Заключение. Получены данные о морфологическом профиле крови собак разных возрастных групп при бабезиозе. Было показано, что количество эритроцитов, которое является наиболее информативным, в 30% случаев может оставаться нормальным. Наиболее выражено бабезиаз протекает у собак до 2 лет, а животные возрастом от 2 до 7 лет зачастую не имеют изменений в морфологическом составе крови. Поэтому при подозрении на бабезиоз обязательно нужно проводить микроскопию обогащенного мазка крови.

Список литературы:

1. Акимов, Д. Ю. Индикаторные показатели в лабораторной диагностике бабезиоза / Д. Ю. Акимов, Л. А. Шадыева, Т. М. Шленкина // Вестник Ульяновской ГСХА. 2015. № 4 (32). С. 106-111.

2. Биохимические показатели крови собак разного возраста при бабезиозе / Е. В. Михайлов, Б. В. Шабунин, С. М. Воротникова, К. Г. Ломакина // Ветеринария. 2020. № 11. С. 40-43.

3. Akel T., Mobarakai N. Hematologic manifestations of babesiosis // Annals of clinical microbiology and antimicrobials. 2017. Vol. 16. No. 1. P. 1-7.

4. Baric Rafaj R. et al. Markers of coagulation activation, endothelial stimulation, and inflammation in dogs with babesiosis // Journal of Veterinary Internal Medicine. 2013. Vol. 27. No. 5. P. 1172-1178.

5. Kirtz G. et al. In-clinic laboratory diagnosis of canine babesiosis (Babesia canis canis) for veterinary practitioners in Central Europe // Tierarztliche Praxis Ausgabe K: Kleintiere/Heimtiere. 2012. Vol. 40. No. 02. P. 87-94.

Резюме. Несмотря на широкую распространенность бабезиоза собак, в литературе практически отсутствуют данные о его течении и проявлениях у животных разного возраста. В то же время возраст животного играет большую роль при прогнозировании течения и назначении эффективного лечения, именно поэтому изучение проявлений бабезиоза у собак разного возраста на данный момент является актуальным. В статье представлены данные по изучению проявления бабезиоза у собак разных возрастных групп. Авторами выявлялись частоты отклонений морфологических показателей крови при помощи диаграмм. При анализе полученных данных о морфологическом профиле крови собак разных возрастных групп при бабезиозе было установлено, что количество эритроцитов, которое является наиболее информативным, в 30% случаев может оставаться нормальным. Наиболее выражено бабезиоз протекает у собак до 2 лет, а животные возрастом от 2 до 7 лет зачастую не имеют изменений в морфологическом составе крови. Поэтому при подозрении на бабезиоз обязательно нужно проводить микроскопию обогащенного мазка крови.

Ключевые слова: бабезиоз собак, Babesia canis, мазок крови, анализ крови, морфологический профиль крови, микроскопия крови, возраст.

Сведения об авторах:

Беспалова Надежда Сергеевна, доктор ветеринарных наук, профессор кафедры ветеринарно-санитарной экспертизы, эпизоотологии и паразитологии ФГБОУ ВО «Воронежский государственный аграрный университет им Петра 1»; 394087, г. Воронеж, ул. Мичурина, 1; e-mail: nadezh.bespalova2014@yandex.ru.

Крутов Илья Олегович, студент ФГБОУ ВО «Воронежский государственный аграрный университет им Петра 1»; 394087, г. Воронеж, ул. Мичурина, 1; e-mail: ilya.krutov.02@mail.ru.

Ответственный за переписку с редакцией: Шабунин Борис Викторович, студент ФГБОУ ВО «Воронежский государственный аграрный университет им Петра 1»; 394087, г. Воронеж, ул. Мичурина, 1; тел.: 8-920-4167311; e-mail: bv.shabunin@gmail.com.

	Полезные ссылки
Департамент ветеринарии Краснодарского края Ассоциация Практикующих Ветеринарных Врачей