|
УДК 619:636.5:577.18:615.281.9 DOI 10.33861/2071-8020-2023-3-39-42 Кривоногова А. С., Исаева А. Г., Логинов Е. А., Мильштейн И. М., Донник И. М. Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Уральский государственный аграрный университет», г. Екатеринбург Проблема антимикробной резистентности с каждым годом все более беспокоит ученых во всем мире. Об интересе к данной проблеме свидетельствуют обсуждения проблемы на разных площадках от международных конференций и симпозиумов до принятия нормативных документов контролирующими органами государств. Проблема формирования и распространения антимикробной резистентности у микроорганизмов, в том числе условно патогенных, встала настолько остро, что в Европе в 2006 году было принято решение о запрете применения сельскохозяйственным животным и птице антибиотиков в кормовых целях. Тем не менее, и в настоящее время в состав комбикормов, особенно в промышленном птицеводстве, широко включают кормовые антибиотики. По данным ВОЗ причиной появления резистентных штаммов в 40-50% случаев является применение антибиотиков в сельском хозяйстве. Антибиотикорезистентность - естественный биологический процесс адаптации микроорганизмов к факторам окружающей среды. Микроорганизмы, как правило, приобретают устойчивость к антибиотикам из-за их широкого, бесконтрольного и неправильного применения. На протяжении последних лет во всем мире отмечается значительный рост устойчивости возбудителей инфекций к антимикробным препаратам (далее, АМП). Уровни резистентности к антибиотикам (далее, АБ) могут быть глобальными, региональными и локальными. Примерами микроорганизмов, которые во всем мире стремительно вырабатывают резистентность к существующим АМП, являются стафилококки, пневмококк, синегнойная палочка, кишечная палочка и др. Более 20 лет назад на Всемирном Дне Резистентности (16 сентября 2000 года, Торонто, Онтарио, Канада) принята декларация по борьбе с антимикробной резистентностью. В декларации обстоятельно была обозначена Глобальная стратегия ВОЗ по сдерживанию резистентности к антимикробным препаратам (2001 г.). Мероприятия стратегии направлены на содействие разумному применению антибиотиков с целью минимизировать резистентность и дать возможность следующим поколениям применять эффективные антимикробные препараты. К сожалению, продолжающее и в настоящее время использование антибиотиков в пищевой промышленности способствует росту антибиотикорезистентности. В настоящее время 50% всех производимых антибиотиков применяется в сельском хозяйстве не только для лечения больных животных, но и в качестве стимуляторов роста продуктивных животных и птиц. Устойчивые микроорганизмы могут передаваться от животных к человеку. Применение антимикробных препаратов (далее, АП) в сельском хозяйстве и ветеринарии способствует накоплению резистентности в окружающей среде. Очень важной проблемой остается разработка новых АП (например пробиотиков). Целесообразно проводить исследования для определения наиболее активного препарата в группах антибиотиков для контроля развития резистентности. В научной литературе появляются новые и новые данные о попытках использования различных препаратов для замены существующей линейки АМП для кормовых целей в птицеводстве. Большой интерес представляет использование фитобиотиков в промышленном животноводстве и птицеводстве в качестве замены стимуляторам и профилактическим антибиотикам [4, 12, 14, 16]. Общее воздействие фитобиотиков на организм сельскохозяйственной птицы связано не только с антимикробным эффектом, но и с их положительным влиянием на состав кишечного микробиома, структурные и физиологические характеристики слизистой оболочки кишечника, процессы пищеварения [4, 6, 12, 15]. На положительный эффект от применения ферментативных фитобиотиков на основе эфирных масел курам-несушкам указывали Е.Р. Нуралиев и И.И. Кочиш [11]. Abad P. и соавторы (2020), Kothari D. и соавторы (2019) приводят данные об улучшении показателей продуктивности несушек и питательной ценности яиц на фоне применения фитобиотиче-ских добавок, содержащих биологически активные метаболиты семейства Луковые [1, 5, 8, 9]. Также представляет интерес применение бактериофагов в терапии инфекционных патологий человека и животных, связанных с условно патогенными и патогенными бактериями. Способность бактериофагов проникать в бактериальные клетки и их высокая видоспецифичность позволяют эффективно элиминировать из микробиома нежелательные патогены, не затрагивая при этом полезную микрофлору [1, 3]. Очень важно, что при использовании препаратов, содержащих лизирующие бактериофаги, минимизируется риск переноса мобильных генов резистентности бактерий, что привлекательно в терапии инфекций, вызванных устойчивыми к антибиотикам штаммами патогенов [2, 7, 10]. К числу наиболее распространенных бактериальных патогенов, связанными с домашней птицей, относятся представители родов Salmonella, Escherichia, Campylobacter, Klebsiella, Staphylococcus, Clostridium, Pseudomonas и Enterobacter [13]. Нами были проведены исследования в указанных направлениях на продуктивной птице с целью изучения возможной альтернативы кормовым антибиотикам. Материалы и методы исследований. Для решения были поставлены задачи: изучить темпы развития антибиотикорезистент-ности представителей микробиоценозов кур яичных кроссов при использовании рационов, содержащих антимикробные компоненты и изучить развитие антибиотикорезистентности представителей микробиоценозов кур яичных кроссов при использовании рационов, содержащих фитобиотические препараты, не вызывающих устойчивость у бактерий. Также исследовали возможность применения бактериофагов в качестве альтернативы антибиотикам для нормализации микрофлоры желудочно-кишечного тракта у кур мясного кросса. Для оценки перспективности применения растительных препаратов проводили исследования совместного и раздельного применения антибиотика и фитобиотического препарата на курах-несушках Ломан-классик 400 дневного возраста. Для этого формировали 4 группы, три из которых получали экспериментальные добавки в рацион, одна оставалась контрольной. Курицам группы № 1 в течение недели вводили в рацион энрофлоксацин 10% из расчета 0,5 мл/л воды для поения. Группа № 3 в течение двух недель получала в качестве добавки в рацион фитобиотик на основе жмыха облепихи, травы клевера лугового, масел облепихи, горчицы и кедра, рецептура которого была разработана совместно с коллективом ФГБУН НИИСХ Крыма. Несушки группы № 2 получали и антибиотик, и фитобиотик одновременно. Группа № 4 (контрольная), добавок в рацион не получала. В течение эксперимента отбирали смывы для микробиологических исследований, кровь для биохимического и гематологического анализов, пробы яйца для химического анализа, а также оценивали яйценоскость несушек и массу яйца, определяли остаточное содержание энрофлоксацина в яйце от несушек, получавших антимикробный препарат, методом ВЭЖХ в соответствии с утвержденной методикой. Биохимические исследования плазмы крови выполняли на анализаторе ChemmWell 2910 (Combi) методами, рекомендованными IFCC; иммуногематологические исследования проводили по стандартным методикам с выведением лейкоформулы, оценкой показателей красной и белой крови, фагоцитарной активности, осмотической резистентности эритроцитов, миелопероксидазы в лейкоцитах крови. Для микробиологических исследований брали смывы с клоаки кур. Проводили идентификацию изолятов и определение чувствительности наиболее клинически значимых изолятов к антибиотикам методом MALDI-TOF масс-спектрометрии, также использовали диско-диффузионный метод и метод серийных разведений. Анализ генов резистентности бактерий выполняли методом ПЦР. Также проводили опыт с бактериофагами на цыплятах мясного кросса «Росс 308», возраста 30 суток (т=30). В опытной группе в течение 10 цыплятам давали препарат, содержащий смесь бактериофагов, активных против Salmonella, Р. aeruginosa, Е. coli, Proteus, Enterococcus, Staphylococcus («Интести-бактерио-фаг», производство НПО «Микроген») в дозе 1 мл/голову в сутки перорально. До и после введения препарата отбирали пробы для бактериологических исследований; также перед убоем на 56 сутки оценивали живой вес. Статистический анализ полученных данных проводили в программах MS Excel и Statistica 10,0. Результаты исследований и их обсуждение. Результаты исследований смывов с клоаки кур показали, что в количественном отношении наибольшую долю выделенных культур составляли изоляты E. coli - средняя обсемененность в группах составляла 1,9x103 - 5,5х103/обр. Также во всех группах были выявлены стафилококки, представленные видами S. equorum и S. xylosus. Энтерококки были представлены E. faecium. Род Candida был представлен только C. catenulata. В малых количествах обнаруживали представителей родов Acinetobacter spp., Aerococcus spp., а в группах 2,3 также Klebsiella oxytoca (табл.1). В целом, спектр микроорганизмов был представлен типовыми условно-патогенными видами бактерий, характерными для микробиоценозов теплокровных животных: E. coli, E. faecium, E. faecalis, E. cloaceae, C. catenulata, а также S. aureus, S. xylosus, S. equorum Corynebacterium spp., Penicillum spp., T. asachii. После завершения цикла введения добавок антибиотиков и фитобиотика в рацион несушек существенных изменений в структуре микробиоценозов не обнаруживали. Отмечали увеличение количества видов энтерококков за счет E. faecalis, E. avium, E. casseliflavus, стафилококков за счет S. vitulinus, коринебакте-рий. Примечательно, что на долю золотистого стафилококка приходилось малое количество изолятов, не более 4,9х101 КОЕ/обр., в то время как основная масса обнаруженных стафилококков была представлена S. equorum (7,8х102/обр.), S. xylosus (8,6х102/обр.) и S. vitulinus (1,8х102/обр.), при этом величина различий между группами достигала 8,5 раз. Была установлена тенденция к снижению микробной нагрузки по стафилококкам после завершения опыта: в группе 2 снизилась в 2,7 раза, в группе 3 - в 1,6 раза, в группе 4 - в 1,4 раза. Однако при этом в группе 1, получавшей энрофлоксацин, обсеменность стафилококками, напротив, выросла почти в 2 раза. Таблица 1 Средняя бактериальная обсемененность смывов с клоаки кур стафилококками, энтерококками и кишечной палочкой до и после применения препаратов (КОЕ/образец) Этап | Микроорганизм | Группа I (энрофлоксацин) | Группа II (энрофлоксацин + фитобиотик) | Группа III (фитобиотик) | Группа IV (контроль) | Среднее по всем группам | До опыта (1 сутки) | E. coli | 5 500 | 3 143* | 1 988* | 2 764 | 3 349 | S. equorum | 720 | 2 690 | 950* | 5 500* | 2 465 | S. xylosus | 570 | 4 407* | 825* | 1 002* | 1 701 | S. aureus | 12 | 7* | 15 | 9* | 11 | Candida spp. | 80 | 65* | 94 | 91 | 83 | E. faecium | 123 | 316 | 387* | 411* | 309 | K. oxytoca | 0 | 4 | 13 | 9 | 9 | Суммарная обсемененность по группе | 7 005 | 10 632 | 4 272 | 9 786 | - | После опыта (40 сутки) | E.coli | 6 307 | 3 850* | 3 672* | 12 643* | 6 618 | S. equorum | 525 | 360* | 761 | 1 500* | 787 | S. xylosus | 810 | 740* | 200* | 1 700* | 863 | S. aureus | 12 | 8* | 19 | 47* | 22 | S. vitulinus | 10 | 602* | 71* | 70* | 188 | E. faecium | 166 | 2 216* | 1 074 | 2 962* | 1 605 | E. avium | 805 | 0 | 1 357* | 176* | 585 | E. casseliflavus | 308 | 3 896* | 1 489 | 1 710 | 1 851 | E. faecalis | 861 | 2 105* | 1 233 | 8 837* | 3 259 | K. pneumoniae | 9 | 4* | 11 | 23* | 12 | Суммарная обсемененность по группе | 9 813 | 13 781 | 9 887 | 29 668 | - | Примечание: * - Р<0,05 разница с контролем достоверна Также во всех группах появились изоляты Klebsiella pneumoniae в количестве от 4 КОЕ/обр. (группа 2) до 23 КОЕ/обр. (группа 4). В группе несушек, получавшей энрофлоксацин совместно с фитобиотиком, суммарная средняя обсеменённость биоматериала по всем выявленным условно-патогенным микроорганизмам была в 2,16 раз меньше, чем в контроле. Большую резистентность демонстрировали изоляты Staphylococcus spp., выделенные из биоматериала. Они в 1 опытной группе проявляли устойчивость к аминогликозидам и ципрофлоксацину в 20,2% случаев, в 2 группе - в 16,7% случаев, в группе 3 -в 17,1% случае и в контрольной группе в 18,5% случаев, что, предположительно, связано с механизмами природной устойчивости отдельных штаммов S. vitulinus и S. xylosus к аминогликозидам и фторхинолонам. Через 40 дней опыта, несмотря на введение антимикробных препаратов изоляты сохраняли такие же уровни резистентности Staphylococcus spp. к ципрофлоксацину, тобрамицину, гентамицину и амикацину. Интересные результаты обнаружили при анализе чувствительности изолятов E. coli. Первоначально выявляли низкую чувствительность к амоксициллину и резистентность к ампициллину, ципрофлоксацину и цефепиму. К 40-му дню применения несушкам препаратов более 90% изолятов имели резистентность к ампициллину, особенно заметно в контрольной группе (96,7%). То есть данные микроорганизмы являются изначально более стойкими к воздействию антимикробных препаратов, что необходимо учитывать при содержании и кормлении яичной птицы. Впоследствии изоляты E. coli и K. pneumoniae исследовали на наличие генов, ассоциированных с продукцией бета-лактамаз расширенного спектра (БЛРС или ESBL). Установили, что изоляты E. coli из групп 2, 3 и 4 были контаминированы генами CTX-M+, связанными с семейством цефотаксимаз, гидролизующих в-лактамное кольцо после ацилирования и обусловливающих устойчивость бактерий ко всем пенициллинам и цефалоспоринам I-IV поколения, азтреона-му. У изолятов E. coli, выделенных из образцов 1 и 4 групп обнаружили гены бета-лактамаз расширенного спектра типа TEM, а у изолятов K. pneumoniae из группы 4 - типа SHV. При этом гены резистентности выявляли в культурах из биоматериала, отобранного как на 1-е, так и на 40-е сутки, что свидетельствовало об изначальной контаминации микробиомов птицы генетическими детерминантами резистентности и их сохранении на протяжении опытного периода. Исследование биохимических маркеров крови куриц проводили с интервалом в две недели. У несушек группы 1, получавших энрофлоксацин, установили достоверное снижение общего белка (на 11,1%), глобулинов (в два разва меньше, чем в контроле - на 15,5%), общей ЛДГ (на 38,6%), что предположительно было связано со снижением антигенной нагрузки вследствие угнетения микрофлоры энрофлоксацином, а также с супрессией гуморальной части иммунитета. Несмотря на биохимические признаки изменения отдельных метаболических процессов при введении в рацион фитобиотика и антибиотика, не было выявлено какого-либо значимого изменения содержания жирорастворимых витаминов в желтке яиц в группах 1-3 по сравнению с аналогичными показателями в контрольной группе. В среднем, после опыта с применением препаратов массовая доля витамина А в желтке была выше и составляла 5,92±1,78 мг/кг, массовая доля токоферола изменилась незначительно (витамин Е) - 70,03±15,6 мг/кг, массовая доля холекальциферола (витамин D3) оставалась менее 0,15 мг/кг. Таким образом, влияния препаратов на насыщение витаминами структур формирующегося яйца установлено не было. Показатели яичной продуктивности несушек были стабильнее и выше в группе 2, где фитобиотик и энрофлоксацин использовались в сочетании: яйценоскость составляла - 0,99, а средняя масса яйца - 65,7 г. При этом худший показатель яйценоскости был зафиксирован в 1 группе, получавшей антибиотик, но при этом средняя масса яйца (65,6 г) в этой группе была выше среднего по поголовью, так же, как и в группе 2. Если сравнивать среднюю массу яйца за неделю в начальный период (до опыта) и в конечный (5 неделя от начала опыта), то можно отметить, что в контрольной группе средняя масса яйца снизилась в целом на 3,94%, в группах 2 и 3, получавших фитобиотик - наоборот увеличилась - на 0,31% и 1,1%, соответственно, а в группе 1, получавшей только антибиотик - не изменилась. Отмечали тенденцию к увеличению толщины скорлупы в группах 2 и 3, получавших фитобиотики, - в 1,5 и 1,4 раза, соответственно. В других группах этот показатель практически не изменялся. Для повышения качества продукции птицеводства большое значение имеют остаточные количества антибиотиков в продуктах. Наши исследования остаточного содержания энрофлоксацина в яйце в группах 1 и 2 через 14 дней после окончания введения препарата «Энрофлон» в рацион несушек показали неоднозначные результаты. Установили, что яйцо от несушек из группы 1, получавшей «Энрофлон», содержало энрофлоксацин в количестве 4 мг/кг даже через 14 дней после отмены препарата. В объединенной пробе яйца от несушек группы 2 (получавших дополнительно фитобиотики) эн-рофлоксацин не был обнаружен. Помимо исследований влияния фитобиотиков, проведенных на поголовье кур-несушек, нами была изучена возможность применения бактериофагов в качестве альтернативы антибиотикам для нормализации микрофлоры желудочно-кишечного тракта у кур мясного кросса.. Установили, что после применения бактериофага в опытной группе частота встречаемости изоля-тов условно-патогенных бактерий уменьшилась по сравнению с контролем в среднем в 2,7 раза. При этом заметнее всего снизилось количество изолятов S. gallinarum - в 6 раз, E. coli - в 2,6, Proteus spp. в 2 раза. В меньшей степени отметили снижение количества энтерококков и стафилококков (в среднем, на 30%). Изоляты Klebsiella spp. в пробах опытной группы отсутствовали. При анализе антибиотикочувствительности изолятов выявили в опытной группе снижение среднего уровня резистентности к фторхинолонам, доксициклину, тобрамицину. В контрольной группе, наоборот, у Staphylococcus spp. наблюдали тенденцию к потере чувствительности изолятов к фторхинолонам и доксициклину. У изолятов E. coli из опытной и контрольной групп обнаружили схожую динамику в отношении левомицетина. Кроме того, выявили динамику в отношении мультирезистентных (MDR) изолятов Staphylococcus spp. - в контрольной группе их доля выросла с 9,1% до 23,1%, а в опытной, где птица получала препарат бактериофага, существенно не изменилась (18,2-16,7%). В контрольной группе у цыплят-бройлеров встречаемость MDR-изолятов Staphylococcus после завершения опыта выросла в 2,5 раза, изолятов E. coli - в 1,4 раза. При анализе живой массы бройлеров перед убоем было обнаружено, что среднее значение показателя в опытной группе было выше, чем в контроле на 149,6 г (3997 г - опытная группа и 3847 - контрольная группа). Таким образом, результаты показали, что использование препаратов бактериофага в цикле выращивания бройлеров было более эффективным, положительно влияло на микрофлору кишечника, уменьшая в его структуре долю клинически значимых условно-патогенных бактерий, имеющих резистентность к антибиотикам, а также приводило к некоторому увеличению живой массы бройлеров. Заключение. Проведенные исследования показали, что в промышленном птицеводстве - как в яичном, так и мясном направлениях, в настоящее время широко используются антибиотики. Микробиом продуктивной птицы в основном представлен 10-15 родами бактерий, часть которых является условно-патогенным. Антимикробная чувствительность данной микрофлоры неоднородна. Наибольшей резистентностью к антимикробным препаратам обладали выделенные из биоматериала штаммы Staphylococcus spp. и E.coli. У изолятов, выделенных из биоматериала яичных кур-несушек мы обнаружили низкую чувствительность вплоть до полной резистентности к 6-8 видам антибиотиков. Большую резистентность микроорганизмы проявляли к аминогликозидам и ципрофлоксацину (в среднем в 20% случаев), к ампициллину (более 90% изолятов). В целом, применение фи-тобиотиков и антибиотиков для коррекции состава микрофлоры пищеварительного траткта у взрослой птицы нецелесообразно, так как воздействия препаратов явно недостаточно для внесения изменений в стабильный и сформированный микробиом. При этом эффект от использования бактериофага был более выраженным, что связано, во-первых, с его специфичным и эффективным действием на конкретные виды бактерий, а во вторых, с применением у цыплят, имеющих несформированные, лабильные по составу микробиомы. По полученным нами данным, наиболее целесообразно применение фитобиотика в дополнение к антибиотикотерапии, так как позволяло сбалансировать нежелательные метаболические эффекты энрофлоксацина, оказывало положительное влияние на состояние иммунных процессов, а также способствовало более быстрому выведению энрофлоксацина из организма и снижению его остаточного содержания в яйцах, что важно для соответствия яичной продукции стандартам качества и требованиям биобезопасности. Также при использовании фитобиотика в сочетании с энрофлоксацином отмечали увеличение яйценоскости несушек. В целом полученные в ходе исследований результаты позволяют создать систему мероприятий сдерживания развития антимикробной резистентности в популяциях сельскохозяйственной птицы. Внедрение данной системы позволит повысить продуктивность и качество получаемой птицеводческой продукции. Исследование выполнено за счет средств гранта Российского научного фонда (проект № 18-16-00040 П). Список литературы: 1. Терапевтическое применение бактериофагов: назад в будущее / Т. С. Перепанова, А. В. Казаченко, П. Л. Хазан, Ю. А. Малова // Клиническая микробиология и антимикробная терапия. 2021. Т. 23. № 1. 2. Allium-Based Phytobiotic Enhances Egg Production in Laying Hens through Microbial Composition Changes in Ileum and Cecum / M. Rabelo-Ruiz, J. J. Ariza-Romero, M. J. Zurita-Gonzalez et al. // Animals. 2021. p. 11. 3. Bacteriophage receptors, mechanisms of phage adsorption and penetration into host cell / D. V. Rakhuba, E. I. Kolomiets, E. S. Dey et al. // Pol J Microbiol. 2010. Vol. 59. pp. 145-155. 4. Baldzhi Y. A., Sultanaeva L. Z. Efficiency of the use of phytobiotic additives in the diet of large and small cattle (review) // Livestock and fodder production. 2021. No. 2. P. 1. 5. Effect of Allium extract supplementation on egg quality, productivity, and intestinal microbiota of laying hens / P. Abad, N. Arroyo-Manzanares, J.J. Ariza et al. // Animals. 2020. Vol. 41. pp. 48-54. 6. Effectiveness of a phytobiotic and a probiotic in diets for broiler preparental lines selected by the center for genetics and selection ‘Smena’ / V. G. Vertiprakhov, I. A. Egorov, T. N. Lenkova et al. // Veterinaria i Kormlenie. 2020. No. 6. pp. 7-12. 7. Forecasting the dissemination of antibiotic resistance genes across bacterial genomes / M. M. H. Ellabaan, C. Munck, A. Porse. et al. // Nature Communications. 2021. 8. Genus Allium as poultry feed additive: review / D. Kothari, W.-D. Lee, K.-M. Niu, S.-K. Kim // Animals. 2019. V. Vol. 9. pp. 1032. 9. Gut Microbiota of Laying Hens and Its Manipulation with Prebiotics and Probiotics to Enhance Gut Health and Food Safety / S. Khan, R. J. Moore, D. Stanley, K. K. Chousalkar // Applied and Environmental Microbiology. 2020. Vol. 86 (13). pp. 5-10. 10. Lerminiaux N. A., Cameron A. D. S. Horizontal transfer of antibiotic resistance genes in clinical environments // Canadian Journal of Microbiology. 2019. No. 65 (1). P. 34-44. 11. Nuraliev Y. R., Kochish I. I. Application of Provitol phytobiotic to improve feed conversion in commercial poultry farming // Bulletin of Altai State Agricultural University. 2017. No. 8 (154). pp. 116. 12. Selivanova Yu. A. Wide Range of Phytoncides Improve Functionality of Phytobiotics // Poultry breeding. 2018. No. 1. pp. 37-40. 13. Sklar I. B., Joerger R. D. Attempts to utilize bacteriophage to combat Salmonella Enterica Serovar Entemtidis infection in chickens // J. Food Saf. 2001. 21. pp. 15-29. 14. Strelnikova I. I., Kislitsyna N. A. Effectiveness of phytobiotics in poultry farming // Vestnik of the Mari State University. 2020. Vol. 6. No. 4. pp. 433-444. 15. Use of phytobioticts in farm animal feeding (review) / O. A. Bagno, O. N. Prokhorov, S. A. Shevchenko et al. // Agricultural Biology. 2018. V. 53. No.4. pp. 687-697. 16. Yamashiro Y. Gut Microbiota in Health and Disease // Annals of Nutrition and Metabolism. - 2017. -71. - № 3-4. - P.p. 242-246. doi: 10.1159/000481627. Epub 2017 Nov 14. PMID: 29136611. Резюме. Для сдерживания распространения резистентных или малочувствительных штаммов и повышения эффективности применения антимикробных препаратов проведены исследования среди продуктивной птицы. Микроорганизмы, выделенные из биоматериала от кур-несушек, были представлены в основном 10-15 видами: Escherichia coli, Corynebacterium, Staphylococcus и др. Изоляты Staphylococcus spp. имели высокую резистентность к аминогликозидам и ципрофлоксацину (в 20% случаев). Более 90% изолятов изолятов E. coli имели резистентность к ампициллину. Применение фитобиотика в сочетании с энрофлоксацином оказало положительное влияние на метаболические процессы и иммунный статус, а также продуктивные качества несушек. Установили, что изоляты E. coli из опытных и контрольной групп были контаминированы генами CTX-M+, связанными с семейством цефотаксимаз, обусловливающих устойчивость бактерий ко всем пенициллинам и цефалоспоринам I-IV поколения, азтреонаму. В яйце от несушек, получавших антибиотик, обнаруживали остаточное содержание энрофлоксацина спустя 14 дней. В то время как в группе с антибиотиком и фитобиотиком энрофлоксацин обнаружен не был. После использования бактериофагов в биоматериале цыплят снизилась частота встречаемости изолятов Staphylococcus spp., Enterococcus faecium, Escherichia fergusonii, Klebsiella spp. В контрольной группе (II) цыплят-бройлеров встречаемость MDR-изолятов в биоматериале, взятом после завершения опыта, выросла: Staphylococcus spp. - в 2,5 раза, а E. coli - в 1,4 раза. Результаты полученных данных могут косвенно свидетельствовать о быстром росте числа бактерий, имеющих фенотипическую резистентность к антибиотикам в кишечном микробиоме. Применение фитобиотиков и бактериофагов продуктивной птице мясных и яичных кроссов перспективно для коррекции микробиоценозов и снижения их обсеменённости изолятами, резистентными к антибиотикам, а также для повышения продуктивных качеств. Ключевые слова: энрофлоксацин, фитобиотик, бактериофаг, условно-патогенная микрофлора, продуктивная птица, бройлеры, несушки, антимикробная резистентность, антибиотикочувствительность, микробиом Сведения об авторах: Кривоногова Анна Сергеевна, доктор биологических наук, доцент ФГБОУ ВО «Уральский государственный аграрный университет»; 620075, г. Екатеринбург, ул. К. Либкнехта,42; тел.: 8-343-3713363; e-mail: tel-89826512934@yandex.ru. Логинов Егор Александрович, аспирант факультета ветеринарной медицины ФГБОУ ВО «Уральский государственный аграрный университет»; 620075, г. Екатеринбург, ул. К. Либкнехта, 42; e-mail: loginov.ea19@gmail.com. Мильштейн Игорь Маркович, кандидат ветеринарных наук, доцент кафедры хирургии, акушерства и микробиологии ФГБОУ ВО «Уральский государственный аграрный университет»; 620075, г. Екатеринбург, ул. К. Либкнехта, 42. Донник Ирина Михайловна, доктор биологических наук, профессор, академик РАН, заведующий кафедрой инфекционной и незаразной патологии ФГБОУ ВО «Уральский государственный аграрный университет»; 620075, г. Екатеринбург, ул. К. Либкнехта, 42; тел.: 8-343-3713363, ktqrjp7@yandex.ru. Ответственный за переписку с редакцией: Исаева Альбина Геннадьевна, доктор биологических наук, доцент, профессор кафедры инфекционной и незаразной патологии ФГБОУ ВО «Уральский государственный аграрный университет»; 620075, г. Екатеринбург, ул. К. Либкнехта, 42; тел.: 8-343-3713363; e-mail: isaeva.05@bk.ru.
|
|