Иммунологический статус у свиней при инфекции М. HYOPNEUMONIAE

А.И. Бутенков, С.Н. Карташов, А.Г. Ключников, А.Н. Тазаян
ГНУ СКЗНИВИ Россельхозакадемии

Комплекс исследований функционального состоя­ния гуморального и клеточного иммунитета у 4-5 месячных поросят больных энзоотической пневмо­нией вызванной М. Hyopneumoniae, выявил резкое снижение количества В-лимфоцитов, а так же нарастающее снижение общего числа Т-лимфоцитов и отдельных популяций Р0К(р-РОК и в-РОК), что, по всей видимости, отражают нарушение лимфопоэза, а также перераспределение клеток и изменение регуляторного потенциала лимфоидных тканей у заболевших животных.

Актуальность. Энзоотическая пневмония свиней, вы­званная М. hyopneumoniae с первичными пневмониями у свиней широко распространена и представляется как одна из экономически важных болезней свиней. В связи с отсутстви­ем типичных симптомов болезни распознавание ее весьма затруднительно. У 75% убойных свиней находят очаги пневмо­нии, характерные для энзоотической пневмонии [3]. Заболе­ваемость в отдельных хозяйствах может достигать 100%, од­нако смертность, которая наблюдается среди 3—6-недельных поросят, колеблется от 0,5 до 20% [3]. Первая стадия болезни длительностью до 14 дней характеризуется кашлем и лихорад­кой ремитирующего типа. В этой стадии животные сохраняют аппетит. Во второй хронической стадии длительностью до 20-25 дней и более появляются признаки пневмонии. Поросята становятся вялыми, не принимаю корм, спина изгибается, по­является слизисто-гнойный конъюнктивит, насморк (чихание и фырканье при приеме пищи). Кашель является основным и ведущим клиническим признаком, и он встречается у 50% больных поросят [1,2].

В крови больных поросят снижается количество эритро­цитов и гемоглобина, развивается относительный лейкоцитоз с нейтрофилией, увеличивается содержание у-глобулинов.

Течение и исход болезни зависят не только от вирулен­тности возбудителя, но и от факторов внешней среды, влия­ющих на резистентность организма. При создании хороших условий содержания и кормления многие животные выздо­равливают [2,3].

Цель исследования. Выяснить распространение энзо­отической пневмонии свиней, состояние гуморальной и кле­точной систем иммунитета у свиней больных энзоотической пневмонией вызванной М. Hyopneumoniae.

Материал и методы. Опыты проводили на 3-х группах поросят по 20 голов в каждой. Группы формировались по при­нципу пар-аналогов.

Первая группа, контрольная, включала клинически здоровых животных без признаков заболевания.

Во вторую опытную группу были включены животные с первой стадией заболевания, у которых отмечался кашель, но был со­хранен аппетит.

Третья опытная группа животных, включала поросят со второй стадией заболевания, характеризующейся кашлем, тяжелой одышкой, адинамией, анорексией.

Опреде­ление концентрации сывороточных иммуноглобулинов прово­дили с помощью реакции Манчини. Определение количества Т - лимфоцитов и их субпопуляций проводили методом розет-кообразования — Е-РОК, тимусзависимые Т-лимфоциты име­ют рецепторы для эритроцитов барана, которые выступают, таким образом, специфическим маркером для их распознавания (Е-РОК: Erythrocyte — розеткообразующие клетки). Выяв­ляли 2 субпопуляции: теофиллинчувствительные Т-лимфоциты (Т-супрессоры), утратившие способность к розеткообразова-нию под влиянием обработки теофиллином, и теофиллинус-тойчивые Т-клетки (Т-хелперы) лимфоциты, такую способность сохранившие.

Результаты исследования. В период с июля по декабрь 2008 года было исследовано 1038 голов поросят 3-5 месяч­ного возраста, из них у 431 голов (41,52%) в полимеразной цепной реакции был обнаружен геном микоплазм, клиничес­ки заболевание проявлялось у 529 голов (51%).

Наряду с микоплазменной инфекцией из 94 клинически больных поросят у 33 (35,1%) из них зарегистрирован репро-дуктивно-респираторный синдром (РРСС), 18 случаев (19,1%) приходилось на микоплазмоз с репродуктивно-респираторным синдромом соответственно. У 12 (12,8%) поросят микоплаз­менной инфекции сопутствовала бактериальная пневмония, а у 8 (8,5%) поросят мы наблюдали бактериальную септицемию. Выявлено только 2 случая (2,1%), когда микоплазмоз был об­наружен без присутствия других возбудителей.

Аналогичные исследования проводились в США в 2001-2002 году. По данным R.M. Pogranichniy, K.Yoon (2002) ми-коплазмозу в 40% сопутствовал респираторно-репродуктивный синдром, а парвовирус встречался всего в 7,5% случаев. Вместе с тем, авторы приводят сведения об эндогенном рет-ровирусе свиней, который встречался в 100% случаев [4,6].

Как правило, ретровирусы инфицируют соматические клетки. Способность эндогенного ретровируса образовывать инфекционные вирусные частицы теряется вследствие мута­ций. Если сохраняется способность к ретропозиции, число ко­пий провируса в геноме возрастает, хотя новых инфекций не возникает [7].

Эндогенные ретровирусы и родственные элементы су­ществуют, по-видимому, у всех позвоночных, включая эндо­генные ретровирусы свиней (PERV), и в большом количестве существуют эндогенные ретровирусы у человека. Известно, что геномы свиней, в зависимости от породы животного, со­держат разные типы PERV [3,7].

При анализе данных, полученных в результате бактери­ологического исследования поросят, у которых микоплазмен-ная инфекция сопровождалась септицемией, было установ­лено, что в 2-х случаях выделен Heamophilus parasuis, по 3 случая приходилось на Е. Coli и Salmonella sp. и в 5 случаях был выделен Streptococcus suis. Таким образом, бактериаль­ная септицемия выявлена у 9% поросят с признаками энзоо­тической пневмонии свиней.

Нами проведен анализ сопутствующих бактериальных ле­гочных инфекций. Установлено, что у 5,3% поросят, у которых микоплазменная инфекция проявлялась клинически, в легких выделена Pasteurella multocida, в 3,2% случаев - Bordetella bronchiseptica и в 1,1%случаев - Actibacilluspleuropneumoniae. Бактериальная пневмония сопутствовала микоплазмозу в 12,8% случаях у клинически больных поросят.

Установлено, что у поросят первой опытной группы отме­чается снижение общего числа лейкоцитов периферической крови, что, кроме того, сопровождается выраженной лимфопения и лимфопения, количество Т-лимфоцитов периферической крови снизилось до 29,1±1,4% в перовой стадии заболевания и увеличилось до 68,6±1,2% во второй стадии заболевания. Однако, на фоне лимфопении абсолютное значение лимфоци­тов снизилось до 0,69±0,038хЮ9/л в перовой стадии заболе­вания и до 0,43±0,05*109/л во второй стадии заболевания. Соотношение Т-хелперов к Т-супрессорам также изменялось, и по мере развития заболевания снижалось с 2,17 до 1,58 (таб. 1).

Таблица 1. Показатели клеточного иммунитета периферической крови

Группа живот­ных	Т- лимфоциты, %
	Т-лимфоциты		Т-хелперы		Т-супрессоры		Tх/Tc
	%	х109/л	%	х109/л	%	х109/л
контрольная (n=20)	48,7±0,4	1,38±0,04	27,8±0,8	0,41±0,01	12,5±0,4	0,18±0,011	2,17
первая опытная (n=20)	29,1±14**	0,69±0,38	15,91±0,8**	0,11±0,013	9,32±0,5**	0,064±0,031	1,65
вторая опытная (n=20)	68,6±1,2***	0,43±0,05	11,83±0,8***	0,04±0,019	7,19±0,6***	0,031±0,011	1,58
*р<0,05, ** р <0,01 *** р <0,001, в сравнении со здоровыми животными

Все эти изменения — снижение общего числа Т-лимфо­цитов и отдельных популяций РОК, снижение их соотношения (р-РОК и в-РОК) — по всей видимости, отражают нарушение лимфопоэза и перераспределение клеток, а также изменение регуляторного потенциала лимфоидных тканей по мере разви­тия энзоотической пневмонии. Из теории общей иммунологии [3], выраженное снижение количества Т-лимфоцитов по отно­шению к здоровым животным сопровождается снижением клеточного иммунитета, что влечет за собой падение резис­тентности, в первую очередь, к вирусным инфекциям [2].

Результаты определения относительного и абсолютного со­держания В-лимфоцитов у поросят в возрасте 3-6 недель, боль­ных энзоотической пневмонией представлены в таблице 2.

Таблица 2. Показатели гуморального иммунитета периферической крови

Группа ЖИВОТНЫХ	В-лимфоциты		Иммуноглобулины
	%	х109/л	А, мг/мл	G, мг/мл	М, мг/мл
контрольная (n=20)	23,6±1,97	0,69±0,04	2,13±0,08	10,9±0,12	1,34±0,2*
первая опытная (n=20)	13,97± 1,89	0,35±0,06*	2,13±0,08*	10,9±0,12	1,4±0,04
вторая опытная (n=20)	33,46±0,28	0,20±0,06*	1,49*0,03*	11,8±0,11	1,5±0,09
*р< 0,001 в сравнении со здоровыми животными

Анализ показателей, характеризующих гуморальное зве­но иммунитета, выявил, что абсолютное содержание в крови В-лимфоцитов у здоровых поросят составило 0,69±0,04хЮ9/л.

При энзоотической пневмонии свиней в первой стадии заболевания количество В-лимфоцитов периферической кро­ви снизилось до 13,97±1,89% и увеличилось до 33,46±0,28% во второй стадии заболевания. Но на фоне лимфопении абсо­лютное значение лимфоцитов снизилось до 0,35±0,06*109/л в первой стадии заболевания, до 0,20±0,06*109/л во второй стадии заболевания. При изучении изменений количества им­муноглобулинов отмечено, что в первой стадии заболевания содержание иммуноглобулина-А, G и М не отличается от здоро­вых животных, но во второй стадии энзоотическом пневмонии происходит резкое снижение иммуноглобули­на А до 1,49±0,03 мг/мл, что на 30% ниже соответствующих показателей у здоровых животных и поросят во второй стадии забо­левания. Уровень иммуноглобулина G и М статистически мало отличался от животных первой и второй опытных групп.

Выводы. Снижение общего числа В-лимфоцитов, Т-лимфоцитов, отдельных фрак­ций иммуноглобулинов и отдельных популя­ций РОК, снижение их соотношения (р-РОК и в-РОК), по всей видимости, отражают нару­шение лимфопоэза, а также изменении регу-ляторного потенциала лимфоидных тканей по мере развития заболевания. Из теории об­щей иммунологии известно, что, выраженное снижение количества Т-лимфоцитов по отно­шению к здоровым животным сопровождает­ся снижением клеточного иммунитета и это влечет за собой падение резистентности, в первую очередь, к вирусным инфекциям [2].

Список литературы:

1. Апатенко В.М. Иммунодефицит у животных. /В.М. Апатенко// Ветеринария. -1982. - N° 5. - С. 29 - 30.
2. Кукушкин С.А. Пролиферативно-некротизирующая пневмония свиней. / С.А. Кукушкин, Т.З. Байбиков, В.Ф. Ковалишин, A.M. Тимина, А.С. Яковлева // Ветеринария, 2005. - N°9. - С. 17-20.
3. Орлянкин Б.Г. Инфекционные рес­пираторные болезни свиней. / Б.Г. Орлянкин, Т.И. Алипер, Е.А. Непоклонов// Ветеринария

	Полезные ссылки
Департамент ветеринарии Краснодарского края Ассоциация Практикующих Ветеринарных Врачей