Перспективы применения ливазена в терапии гепатоза коров, индуцированного метаболическими нарушениями

УДК 619:616-086.618.36

Семененко М.П., Кузьминова Е.В., Зотова Т.А., Тяпкина Е.В. ФГБНУ "Краснодарский
научно-исследовательский ветеринарный институт", г. Краснодар
Лысенко А.А. ФГБОУ ВО "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т Трубилина", г. Краснодар

В современных условиях основной тенденцией развития молочного скотоводства является увеличение его продуктивности при одновременном снижении себестоимости получаемой продукции. Однако внедрение в практику интенсивных технологий кормления и содержания высокопродуктивных коров зачастую приводит к возникновению несоответствия между физиологическими возможностями их организма с фактическими параметрами кормления и содержания, обусловленными низким адаптивным потенциалом [6]. Развитие патологического состояния в таких условиях, как правило, сопровождается широким спектром отклонений со стороны основных констант гомеостаза, приобретающих форму сложного метаболического синдрома, одной из наиболее распространенных форм которого являются глубокие дисфункциональные изменения ге-патобилиарной системы [2].

К одной из наиболее часто встречаемых патологий печени относят гепатозы, регистрируемые порой до 50% случаев от общей гастроэнтеральной патологии у молочного скота и характеризующиеся дистрофическими изменениями органа. В некоторых случаях гепатозы регистрируют как первичное, но чаще - как вторичное, сопутствующее заболевание, обусловленное нарушениями условий кормления и содержания животных [8].

Печень - орган с большим функциональным резервом. Необходимо поражение большой части ее паренхимы, чтобы клинически появились нарушения функции гепатоцитов. Поэтому, большинство болезней печени протекают длительное время скрыто, бессимптомно, что затрудняет их своевременную диагностику и разработку эффективных средств коррекции [5, 7].

Лечение заболеваний гепатобиллиарной системы у высокопродуктивного рогатого скота предусматривает два основных направления. Первое - это устранение основных причин, способствующих возникновению и развитию заболевания, а второе - проведение патогенетической терапии, направленной на адекватную фармакологическую коррекцию различных звеньев патогенеза болезни с помощью гепатопротекторов [4, 8].

К сожалению, на сегодняшний день, несмотря на обширный арсенал современных гепатозащитных средств, поиск, разработка и

внедрение в ветеринарную практику новых гепатопротекторных препаратов, обладающих эффективными фармакологическими свойствами, низкой токсичностью и незначительным побочным действием, продолжает оставаться актуальным [1, 3, 9].

В этом аспекте безусловный интерес представляет новый ге-патопротектор ливазен, обладающий выраженными гепатопротек-торными, антиоксидантными, липотропными свойствами. Механизм действия, входящего в состав препарата диизопропиламмония дихлорацетата, обусловлен его антиоксидантным и мембраностабилизирующим действием. Он ингибирует процессы перекисного окисления липидов, повышает активность супероксидоксидазы, модулирует активность мембраносвязанных ферментов, рецепторных комплексов, что усиливает их способность связывания, способствует сохранению структурно-функциональной организации биомембран. Препарат оказывает липотропное действие, благоприятно влияет на антитоксическую и пигментную функцию печени, повышает устойчивость к гипоксии и различного рода интоксикациям [10, 11].

Целью наших исследований явилось изучение препарата ливазен в качестве терапевтического средства при гепатозах коров.

Материалы и методы исследования. Опыты проведены в условиях животноводческих хозяйств Краснодарского края на коровах голштино-фризской породы в возрасте 3-5 лет в период сухостоя с признаками нарушения функциональной активности печени. Диагноз ставился на основании клинического обследования животных, биохимического исследовании сыворотки крови и УЗИ-диагностики.

При клиническом обследовании животных было установлено

общее угнетение, мышечная слабость, прогрессирующее исхудание на фоне снижения аппетита, расстройства преджелудков и желудочнокишечного тракта. На слизистых оболочках и склере глаз выявлялась желтушность. Волосяной покров - матовый, без блеска, температура тела нормальная или несколько пониженная (36,7-37,9оС).

При перкуссии области печени отмечалась болезненность, в большинстве случаев - увеличение задней перкуторной границы. При этом границы в 12-м межреберье доходили до уровня линии седалищного бугра или до уровня % лопатки, в 11-м межреберье - до уровня 2/3 лопатки. При аускультации рубца в середине голодной ямки у больных животных отмечалась атония, непродолжительное время прослушивался слабый звук "шелеста".

При вынужденном убое больных животных регистрировалось увеличение размеров печени, орган был глинистого цвета, с жирным налетом, ткань печени непрочная, легко рвалась.

Ввиду того, что подобная симптоматика не является строго па-тогномоничной, а участие печени в метаболизме характеризуется теснейшим переплетением биохимических и просто химических процессов, для выяснения степени обменных нарушений у обследуемых коров отбирали кровь с последующим биохимическим исследованием.

В белковом обмене у 50% животных выявлялась гипопротеине-мия на фоне выраженной диспротеинемии, в 20% случаев обусловленная снижением количества альбуминов, в 100% случаев - гипер-гаммаглобулинемией, при которой уровень у-глобулинов был повышен в 1,54 раза по сравнению с показателями здоровых животных. У всех животных отмечалось нарушение коллоидной стойкости белков сыворотки крови, что проявлялось увеличением показателя тимоловой пробы.

Выявляемая дисферментемия в 60% случаев была обусловлена повышением активности АсАт (на 30,5%) и АлАт (на 46,7%), а в 90% - щелочной фосфатазы (в 1,59 раза). Повышение уровня билирубина в крови (в 1,76 раза) было типичным для синдрома нарушения целостности гепатоцитов.

Результаты УЗИ-исследования показали, что печень увеличена, края долей неровные, смазаны, плохо отграничивающиеся от окружающих тканей. Отмечены очаги жировой дистрофии от 3*4 до 30*22 мм, которые хорошо визуализировались. Эхоструктура имела пеструю картину, паренхима печени была неравномерно, мелкоочагово уплотнена, участки нормальной эхогенности паренхимы чередовались с повышенной эхогенностью.

Таким образом, комплексом исследований у коров был поставлен диагноз "жировой гепатоз", сопровождающийся широким спектром общих обменных нарушений.

Для проведения эксперимента по принципу парных аналогов было сформировано две группы по 5 животных в каждой (контрольная и опытная). Первой группе внутримышечно вводили препарат ливазен в соотношении 1:5 (4 мл препарата и 20 мл стерильного физиологического раствора) в заднебедренные группы мышц ежедневно в течение 21-го дня. Контрольной группе в том же объеме вводили 25 мл стерильного физиологического раствора.

Учет клинического состояния животных проводили ежедневно, биохимические исследования сыворотки крови - на 14-й и 21-й дни экспериментального периода, УЗИ-диагностику - в конце опыта.

Анализ результатов биохимического исследования сыворотки крови установил, что введение коровам ливазена оказало значительное влияние на ряд показателей (табл. 1).

Таблица 1. Биохимические показатели сыворотки крови животных при лечении ливазеном (M±m; n=5)

Показатель	Фон	На 14-й день исследований		На 21-й день исследований
		контроль	опыт	контроль	опыт
Белок, г/л	63,7±4,3	65,4±3,1	69,9±1,25	68,4±1,8	80,45±2,9*
Альбумины, %	32,4±0,8	31,5±0,5	36,03±1,13	33,9±1,3	41,2±0,5
а-глобулины, %	17,2±0,86	20,7±2,0	15,7±1,93	11,15±0,15	16,8±1,25
р-глобулины, %	4,2±0,7	3,8±0,56	7,31±0,72	11,75±0,18	4,4±0,62
Y-глобулины, %	46,2±1,1	44,0±2,2	40,9±0,65	43,2±1,5	37,6±2,42
Тимоловая проба	+	+	+	+	-
Глюкоза, мМ/л	2,2±0,04	2,2±0,1	2,08±0,05	2,05±0,05	2,48±0,09
Мочевина, мМ/л	3,15±0,54	3,4±0	5,3±0,16	4,05±0,25	7,23±0,96*
Холестерин, мМ/л	3,3±0,09	2,85±0,05	4,4±0,5	3,0±0,1	4,7±0,38
АсАт, Ед	123,5±5,3	101,0±9,0	105,0±4,49	96,8±5,04	77,0±8,0
АлАт, Ед	51,3±1,7	49,5±0,5	41,3±1,49	40,5±1,5	30,0±1,78*
Щелочная фосфатаза, ЕД	241,5±6,8	226,5±4,5	191,8±22,1	229,5±1,5	140,7±8,9*
Тригли­ цериды, мМ/л	0,15±0,02	0,12±0,01	0,18±0,02	0,11±0,01	0,12±0,01
Общий илирубин, мМ/л	9,07±0,72	8,9±0,05	5,28±0,25	7,05±0,05	4,86±0,08*

Примечание: * - степень достоверности Р < 0,05

По уровню протеинового обмена отмечена положительная динамика с достоверным преимуществом увеличения концентрации общего белка в сыворотке крови опытных животных, который на 21-й день исследований увеличился относительно контрольных аналогов на 17,6%, относительно фоновых значений - на 26,3%. Тогда как в контрольной группе уровень общего белка за время эксперимента практически не изменился (повышение на уровне тенденции составило 7,3%), оставаясь за пределами нижних границ нормы. Фракция альбуминов увеличилась на 27,2%, достигнув уровня границ видовой нормы. Отмечена тенденция к снижению у-глобулинов на 18,6%.

Увеличение уровня альбуминов с одновременным снижением иммуноглобулинов, на наш взгляд, является одним из наиболее важных показателей эффективности гепатопротекторной терапии, поскольку отражает процессы активизации белоксинтезирующей функции клеток печени на фоне ослабления воспалительных процессов. Тогда как в контрольной группе коров сдвиги в протеинограммах к концу исследования указывали на усиление воспалительной реакции в гепатоцитах и переходе острой стадии некробиотических процессов в хроническую форму, подтверждаемую положительной тимоловой пробой.

На фоне проведения терапии больных хроническим гепатозом коров наблюдалось достоверное снижение ферментной активности трансаминаз печени при одновременном увеличении этих показателей в группе контроля. К концу эксперимента уровень аспартата-минотрансферазы в опытной группе снизился в 1,6 раза, аланинами-нотранферазы - в 1,71 раза, относительно фоновых показателей и на 20,4% и 17,8% - относительно коров контрольной группы, что свидетельствует об эффективном устранении синдрома цитолиза клеток печени под воздействием препарата.

В результате улучшения метаболических процессов в группе опытных животных наблюдалось повышение уровня мочевины (в 2,29 раза к фону и в 1,78 раза к животным биологического контроля). Достоверно уменьшилась выраженность холестатического синдрома, что характеризовалось снижением активности щелочной фосфатазы в 1,71 раза (р<0,05), общего билирубина - в 1,87 раза. В контроле эти показатели к концу исследований снизились на 5,2% и 28,6%. Уровень глюкозы был относительно стабильным за весь период наблюдения, межгрупповых отличий по данному показателю отмечено не было.

При клиническом осмотре у животных к концу опытного периода была отмечена нормализация работы желудочно-кишечного тракта, улучшение аппетита, двигательной активности.

Таким образом, ливазен показал выраженную терапевтическую эффективность при гепатозе у коров, что подтвердилось результатами УЗИ-диагностики.

Через 21 день применения препарата ливазен ультрасонография печени всех опытных животных показала наличие регенеративных процессов в паренхиме. Края печени были ровными, четкими. Эхоструктура органа имела гомогенное строение с одинаковым распределением сигналов по интенсивности с равномерным изображением сосудов. Очагов жировой дистрофии не наблюдалось.

Заключение. Таким образом, проведенными исследованиями установлено выраженное терапевтическое действие нового гепа-топротекторного препарата ливазена, способствующее улучшению клинического состояния больных животных, восстановлению биохимических показателей крови, проявляемых позитивной тенденцией развития активности маркерных ферментов поражения печени, общих обменных процессов организма, а также восстановлению морфофункционального состояния печени и нормализации физиологического состояния коров.

Список литературы:

1. Грищенко Е.Б. Роль гепатопротекторов в терапии заболеваний печени / Е.Б. Грищенко, М.И. Щекина // Фарматека. 2014. №14 (287). С. 76-79.
2. Кузьминова Е.В. Диагностическое значение биохимических показателей крови при гепатопатологиях / Е.В. Кузьминова, М.П. Семененко, Е.А. Старикова, Т.В. Михалева // Ветеринария Кубани. 2013. № 5. С. 11-13.
3. Кузьминова Е.В. Эффективность каротиноидов при токсическом поражении печени / Е.В. Кузьминова, В.С. Соловьев, М.П. Семененко, С.Н. Николаенко // Труды Кубанского государственного аграрного университета. 2009. № 1-2. С. 117-119.
4. Кузьминова Е.В. Перспективы расширения спектра применения гепа-топротек-торов в ветеринарии /Е.В. Кузьминова, М.П. Семененко, Е.А. Старикова, Е.В. Тяпкина, А.В. Ферсунин // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета, 2014. № 102. С. 787-797.
5. Кузьминова Е.В. Современные подходы к лечению гепатопатий крупного рогатого скота /Е.В. Кузьминова, М.П. Семененко, ТА. Шах-Меликьян // Вестник ветеринарии. 2011. № 4 (59). С. 135-137.
6. Повышение сохранности и продуктивности здоровья импортного молочного скота / Антипов В.А., Семененко М.П., Басова Н.Ю., Турченко А.Н., Сапунов А.Я., Кузьминова Е.В. и. др. // Краснодар, 2009.
7. Семененко М.П. Новые подходы к лабораторной диагностике болезней печени у высокопродуктивного молочного скота /М.П. Семененко, Е.В. Кузьминова, О.А. Фомин //Ветеринария Кубани. 2014. № 3. С. 11-13.
8. Семененко М.П. Этиопатогенез и особенности гепатотропной терапии коров при гепатозах / М.П. Семененко, Е.В. Кузьминова, ФД. Онищук, Е.В. Тяпкина // Ветеринария. 2016. № 4. С. 42-46.
9. Семененко М.П. Доклиническое изучение гепатозащитного средст-ва / М П. Семененко, Е.В. Кузьминова, Е.В. Тяпкина, О.А. Фомин // Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии. 2015. № 2. С. 141-143.
10. Струнин Б.П. Структура лекарственного средства диизопропиламмония дихлорацетата / Б.П. Струнин, А.Т.Губайдуллин, Т.Б.Пахомова, И.Р. Кильмето-ва, и др. // Вестник Казанского технологического университета. 2013. Т. 16. № 3. С. 145-147.
11. Тяпкина Е.В. Опыт применения ликверола в терапии заболеваний печени у коров / Е.В. Тяпкина, М.П. Семененко, Ф.Д. Онищук, О.А. Фомин // В сборнике: Актуальные проблемы современной ветеринарной науки и практики. Материалы Международной научно-практической конференции, посвященной 70-летию Краснодарского научно-исследовательского ветеринарного института. ФГБНУ "Краснодарский научно-исследовательский ветеринарный институт"; ФГ-БОУ ВПО "Кубанский государственный аграрный университет" 2016. С. 121.

Резюме. Наблюдаемая в настоящее время интенсификация промышленного животноводства зачастую ведет к эксплуатации высокопродуктивных коров на пределе физиологических возможностей, вызывая, тем самым, глубокую метаболическую переориентацию органов и систем организма. Комплекс внешних факторов, возрастающие нагрузки в период беременности, отела и лактации приводят к функциональным нарушениям, одной из наиболее распространенных форм которых являются глубокие дисфункциональные изменения гепатобилиарной системы. На этом фоне все возрастающую актуальность приобретает терапия гепатозов с применением гепатопротекторных препаратов. В статье изложены результаты испытания нового инъекционного гепатопротектор-ного препарата ливазен, обладающего выраженными гепатопротекторными, антиоксидантными, липотропными свойствами, в качестве терапевтического средства при гепатозах коров. У отобранных в эксперимент коров комплексом исследований (клинических, биохимических, ультразвуковой диагностики) были установлены признаки нарушения функциональной активности печени, позволившей поставить диагноз "жировой гепатоз". Результатами эксперимента установлено, что внутримышечное введение ливазена коровам в течение 21-го дня оказало выраженное положительное влияние на показатели крови, проявляемое достоверным увеличением уровня общего белка на 26,3 % и альбуминов при одновременном снижении у-глобулинов, что отражает процессы активизации белоксинтезирующей функции клеток печени на фоне ослабления воспалительных процессов; снижением ферментной активности трансаминаз печени в 1,6 раза (АсАт) и в 1,71 (АлАт), щелочной фосфатазы в 1,71 раза, общего билирубина - в 1,87 раза. Эффективность гепатотропной терапии ливазе-ном подтвердилась улучшением клинического статуса животных и результатами УЗИ-диагностики, свидетельствующей о восстановлении паренхимы печени и улучшении функциональной активности гепатоцитов.

Ключевые слова: гепатоз, крупный рогатый скот, печень, гепатоциты, гепатопро-тектор, терапия, ливазен, биохимия, трансаминаза, кровь, альбумин, у-глобулин.

Сведения об авторах:

Кузьминова Елена Васильевна, доктор ветеринарных наук, ведущий научный сотрудник ФГБНУ "Краснодарский научно-исследовательский ветеринарный институт"; 350004, г. Краснодар, ул. 1-я Линия, д. 1; тел.: 8-861-2216220; e-mail: niva1430@mail.ru.

Зотова Татьяна Александровна, младший научный сотрудник лаборатории фармакологии ФГБНУ "Краснодарский научно-исследовательский ветеринарный институт"; 350004, г. Краснодар, ул. 1-я Линия, д. 1; тел.: 8-861-2216220; e-mail: tanja_z@list.ru.

Тяпкина Евгения Викторовна, старший научный сотрудник лаборатории фармакологии ФГБНУ "Краснодарский научно-исследовательский ветеринарный институт"; 350004, г. Краснодар, ул. 1-я Линия, д. 1; тел.: 8-861-2216220; e-mail: jane-tyapkina@ya.ru.

Лысенко Александр Анатолиевич, доктор ветеринарных наук, профессор

кафедры терапии и фармакологии ФГБОУ ВО "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина"; 350044, г. Краснодар, ул. Калинина, 13; тел.: 8-861-2215820; e-mail: vet.kubgau@mail.ru.

Ответственный за переписку с редакцией: Семененко Марина Петровна, доктор ветеринарных наук, заведующая лабораторией фармакологии ФГБНУ "Краснодарский научно-исследовательский ветеринарный институт"; 350004, г. Краснодар, ул. 1-я Линия, д. 1; тел.: 8-861-2216220; e-mail: sever291@mail.ru.

	Полезные ссылки
Департамент ветеринарии Краснодарского края Ассоциация Практикующих Ветеринарных Врачей